HBV感染已成为重要的全球性公共卫生问题，预计全球1/3的人口感染过HBV。感染HBV后机体会出现不同的疾病转归，大部分可自愈，其中约5％发展为慢性感染，如慢性乙型肝炎（chronichepatitisB，CHB），肝硬化(livercirrhosis，LC)及原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)。HBV感染的致病机理较复杂，遗传因素在HBV致病过程中起到了重要的作用，而广泛存在于基因中的基因多态性，即单核昔酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）可导致机体对各种慢性损伤的反应具有明显的个体差异，影响疾病的易感和不同的疾病转归。　　 HLA复合体是首次发现的与疾病有明确关系的遗传系统，2011年7月，一项来自日本的全基因组关联研究(genome-wideassociationstudy，GWAS)发现，HLA-DQ基因的SNP位点rs2856718与CHB有关，尚未见在中国人群中的相关报道，故将此位点纳入本研究;VinodKumar等，报道了一项GWAS研究结果，HLA-DQ基因的SNP位点rs9275572与丙型肝炎病毒相关性肝癌有关，该位点是否与HBV.感染同样具有相关性，在中国人群中是否存在这种关联，是否与抗病毒药物治疗预后相关，尚未见相关报道，故将此位点纳入本研究。　　 2010年8月，HongxingZhang等报道了一项中国人群的GWAS研究结果，位于人类染色体1p36.22的KIF1B基因的rs17401966位点与HBV相关肝癌有关，该位点是否在HBV感染不同结局及药物治疗预后中同样存在相关性，故将该位点纳入本次研究。　　 此外，本室的前期研究发现了与HBV感染结局相关的差异蛋白-真核肽链释放因子GTP结合亚单位(eRF3b)，它是由GSPT2基因编码，它与eRF3a（由GSPT1编码，与eRF3b高度相似，87％的氨基酸序列相同）共同参与中止真核生物蛋白合成的过程。前期，我们进行了关于这两种蛋白与HBV感染的功能学研究，本研究将探讨GSPT1和GSPT2基因的两个SNP位点（rs33635和rs974285）与HBV感染及治疗预后的相关性。　　 第一部分，HLA-DQ、GSPT及KIF1B基因多态性与HBV感染不同结局的关联研究　　 目的:　　 探讨HLA-DQ（rs28567185和rs9275572）、GSPT(rs33635和rs974285)及KIF1B(rs17401966)五个SNP位点与HBV易感性、HBV自然清除及HBV相关疾病进展的关联。　　 方法:　　 选择符合条件的研究对象1649例，根据研究目的，分成不同亚组，分别研究5个SNP位点与HBV易感性（HBV感染组和健康组）、HBV自然清除（HBV感染组和HBV自然清除组）、LC进展（LC组和CHB组）、HCC进展（HCC组和LC+CHB组）的关联。以问卷形式收集研究对象的一般情况，并收集外周血，提取DNA，用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MatrixAssistedLaserDesorption/ionizationTimeofFlightMassSpectrometry，MALDI-TOFMS)实验平台进行DNA的SNPs分型。先进行单因素分析，再用非条件Logistic回归分析校正混杂因素，分析SNP位点与HBV易感性及其感染结局的关联，并用多因子降维法分析基因-基因及基因-环境的交互作用，由SPSS16.0统计软件、MDR2.0及MDRPTV0.4.6完成数据分析。　　 结果:　　 1、HA-DQ多态性位点rs2856718与HBV感染及其结局的关系　　 在共显性模型下，携带rs2856718AG和rs2856718GG基因型的个体感染HBV的风险降低，OR值分别为0.738和0.459（95％CI=0.571-0.954，P=0.020;95％CI=0.331-0.636，P＜0.001）;在显性模型（GG+AGvsAA）和隐性模型（GGvsAA+AG）下，OR值分别为0.641和0.541(95％CI=0.505-0.814,P＜0.001;95％CI=0.403-0.725,P＜0.001);吸烟和饮酒均为HBV感染的独立危险因素（OR=1.688，P=0.006;OR=1.507，P=0.001）;rs2856718与HBV自然清除相关，在共显性模型下，rs2856718与HBV自然清除有关联，携带rs2856718AG和rs2856718GG基因型的个体HBV自然清除能力强（AGvsAA，OR=0.642，95％CI=0.479-0.773，P=0.003;GGvsAA，OR=0.528，95％CI=0.361-0.773，P=0.001）;在显性模型下，rs2856718GG+AG基因型携带者HBV自然清除能力更强，发展为HBV慢性感染的可能性为rs2856718AA基因型携带者的0.610倍(95％CI=0.463-0.805，P＜0.001);在隐性模型下，rs2856718GG基因型携带者HBV自然清除能力强，发展为HBV慢性感染的可能性为rs2856718AA+AG基因型携带者的0.688倍(95％CI=0.492-0.962，P=0.029);吸烟为HBV感染的独立危险因素(OR=1.512，95％CI=1.009-2.264,P=0.045)。　　 2、HLA-DQ多态性位点rs9275572与HBV感染及其结局的关系　　 rs9275572与HBV易感性有关联。在共显性模型下，携带rs9275572AG或rs9275572AA基因型的个体感染HBV的风险降低，OR值分别为0.706和0.374(95％CI=0.553-0.903,P=0.006;95％CI=0.244-0.573,P＜0.001);在显性模型(AA+AGvsGG)下和隐性模型(AAvsGG+AG)下，OR值分别为0.627和0.429（95％CI=0.498-0.790，P＜0.001;95％CI=0.283-0.650，P＜0.001），吸烟和饮酒均为HBV感染的独立危险因素（OR=1.635，P=0.002;OR=1.582，P=0.002）。rs9275572与HBV的自然清除相关，在共显性模型下，携带rs9275572AG基因型的个体HBV自然清除率更高，发展为HBV慢性感染的可能性为rs9275572GG基因型携带者的0.719倍（95％CI=0.544-0.949，P=0.020）;在显性模型下，携带rs9275572AA+AG基因型的个体HBV自然清除率更高，发展为HBV慢性感染的可能性为rs9275572GG基因型携带者的为0.714（95％CI=0.547-0.932，P=0.013）;吸烟是HBV自然清除的独立危险因素(OR=1.527,95％CI=1.022-2.282,P=0.039)。　　 3、GSPT多态性位点rs33635和rs974285与HBV感染及其结局的关系　　 本研究尚未发现rs33635和rs974285两个SNP位点与HBV易感性、HBV自然清除及LC进展和HCC进展的相关性。　　 4、KIF1B多态性位点rs17401966与HBV感染及其结局的关系　　 本研究发现rs17401966基因多态性与HBV自然清除有关联，携带rs17401966GG基因型的个体HBV自然清除的可能性更高，发展为HBV慢性感染的可能性为rs17401966AA基因型携带者的0.568倍(95％CI=0.361-0.894，P=0.015);rs17401966基因多态性与HBV易感性、LC进展及HCC进展无关联。　　 5、基因-基因交互作用　　 经MDR分析，在HBV易感性研究中，最佳因子模型为HLA-DQ位点(rs2856718、rs9275572)、GSPT1位点(rs33635)和KIF1B位点(rs174019664)之间的交互作用(P=0.0010)，高危组合易感风险为低危组合的2.643倍(95％CI=1.458-3.487)。在HBV自然清除研究中，最佳因子模型为HLA-DQ位点(rs2856718、rs9275572)、GSPT1位点(rs33635)和KIF1B位点(rs174019664)之间的交互作用（P=0.023），与HBV自然清除的关联强度为2.024(95％CI=1.156-3.958)。在LC进展和HCC进展研究中均未发现基因-基因间的交互作用。　　 6、基因-环境交互作用　　 经MDR分析，在HBV易感性研究中，准确性和交叉检验一致性最高的因子模型为HLA-DQ位点(rs9275572)、吸烟和饮酒的交互作用（P=0.0010），高危组合易感风险为低危组合的3.014倍(95％CI=1.647-4.963)。在HBV自然清除研究中，最佳因子模型为HLA-DQ位点(rs2856718)和饮酒的交互作用模型（P=0.0010），与HBV自然清除的关联强度为1.923(95％CI=1.185-4.032)。在LC进展研究中，未发现有统计学意义的基因-环境交互作用模型。在HCC进展研究中，最佳因子模型为HLA-DQ位点(rs2856718)、GSPT1位点(rs33635)、KIF1B位点(rs17401966)和吸烟间的交互作用（P=0.0110），高危组合易感风险为低危组合的1.847倍(95％CI=1.265-3.468)。　　 结论:　　 1、在中国北方汉族人群中，HLA-DQ的两个SNP位点(rs9275572和rs2856718)与HBV的易感性，HBV自然清除及HBV感染后的相关疾病进展有关。rs9275572A和rs2856718G为HBV感染的保护性因素，在HBV自然清除、LC进展和HCC的进展中起到保护作用。　　 2、KIF1Brs17401966基因多态性与HBV自然清除有关联，携带rs17401966GG基因型的个体HBV自然清除的可能性更高，与HBV易感性、LC进展及HCC进展无关联。　　 3、本研究未发现GAPT1rs33635和GAPT2rs974285两个SNP位点与HBV易感性、HBV自然清除及LC和HCC进展的相关性。　　 4、吸烟和饮酒均为HBV感染、HBV自然清除的独立危险因素;年龄越大，越容易由CHB进展到LC和HCC;男性、高龄及饮酒为HCC进展的独立危险因素;在HBV易感性、HBV自然清除及HBV感染不同结局中，存在基因-基因和基因-环境的交互作用。　　 第二部分，HLA-DQ、GSPT及KIFIB基因多态性与拉米夫定治疗预后的关联研究　　 目的:　　 本研究拟探讨HLA-DQ（rs28567185和rs9275572）、GSPT（rs33635和rs974285）及KIF1B(rs17401966)五个候选基因与LAM治疗后不同结局的相关性。　　 方法:　　 选择符合条件的研究对象354例，以问卷形式收集研究对象的一般情况，并收集外周血，提取DNA，用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MatrixAssistedLaserDesorption/ionizationTimeofFlightMassSpectrometry，MALDI-TOFMS)实验平台进行DNA的SNPs分型。经LAM治疗6个月后，根据病毒学应答(·DNA载量＜3logcopies/ml或下降＞2logcopies/ml)与否分为两组（DNA应答组与DNA非应答组），根据生化学应答（治疗后ALT在正常参考值范围）分为ALT应答组和ALT非应答组。先进行单因素分析，再用非条件Logistic回归分析校正混杂因素，分析SNP位点与HBV易感性及其感染结局的关联，并用多因子降维法进行基因-基因和基因-环境之间的交互作用分析，由SPSS16.0统计软件、MDR2.0及MDRPTV0.4.6完成数据分析。　　 结果:　　 1、HA-DQ多态性位点rs2856718与DNA应答及ALT应答的关系　　 rs2856718与DNA应答无关联，但与ALT应答具有相关性，rs2856718A等位基因更容易出ALT应答，在共显性模型下(GGvsAA)，OR值为2.458（95％CI=1.277-4.730，P=0.007）;在显性模型(GG+AGvsAA)和隐性模型(GGvsAA+AG)下，OR值分别为1.691(95％CI=1.093-2.615，P=0.018)和2.040（95％CI=1.104-3.772，P=0.020）;性别是ALT应答的独立影响因素，男性ALT应答率低于女性，年龄、吸烟及饮酒与ALT应答无关联。　　 2、HLA-DQ多态性位点rs9275572与DNA应答及ALT应答的关系　　 rs9275572与DNA应答相关，rs9275572G等位基因更容易出DNA应答，共显性模型(AGvsGG∶OR=2.062，95％CI=1.153-3.687，P=0.015;AAvsGG∶OR=5.553，95％CI=1.827-16.877，P=0.003)、在显性模型下(AA+AGvsGG∶OR=2.599，95％CI=1.525-4.428，P＜0.001)和隐性模型下(AAvsGG+AG∶OR=4.684，95％CI=1.552-14.133，P=0.006)均具有相关性;男性患者拉米夫定治疗后DNA应答的可能性较女性低。　　 rs9275572基因多态性与ALT应答具有相关性，rs9275572G等位基因更容易出ALT应答，在共显性模型下(AGvsGG∶OR=2.037，95％CI=1.231-3.369,P=0.006;AAvsGG∶OR=3.245,95％CI=1.415-7.440,P=0.005)、在显性模型下(AA+AGvsGG∶OR=2.279，95％CI=1.442-3.602，P＜0.001)和隐性模型下(AAvsGG+AG∶OR=2.678，95％CI=1.182-6.068，P=0.018)均存在此关联;性别与ALT应答相关，男性LAM治疗后的ALT应答的可能性低于女性（OR=0.509，95％CI=0.297-0.872，P=0.014），年龄、吸烟和饮酒与ALT应答均无相关性。　　 3、GSPT1多态性位点rs33635与DNA应答及ALT应答的关系　　 rs33635C等位基因携带者更易发生DNA应答，在共显性模型下(CCvsTT)，rs33635CC基因型携带者DNA应答的可能性为rs33635TT基因型携带者的2.449倍（95％CI=1.057-5.674，P=0.037）;在隐性模型下(CCvsTT+CT)，rs33635CC基因型携带者DNA应答的可能性为rs33635TT+CT基因型携带者的2.551倍(95％CI=1.138-5.716，P=0.023);性别为DNA应答的独立影响因素，男性DNA应答的可能性降低。　　 在共显性模型(CCvsTT)和隐性模型下(CCvsTT+TC)，rs33635C等位基因携带者更易发生ALT应答(OR=3.587，95％CI=1.727-7.450，P=0.001;OR=3.840，95％CI=1.910-7.720，P＜0.001);性别与ALT应答相关，男性患者ALT应答的可能性均降低。　　 4、GSPT2多态性位点rs974285与DNA应答及ALT应答的关系　　 尚未发现GSPT2多态性位点rs974285与DNA应答及ALT应答的相关性。　　 5、KIFIB多态性位点rs17401966与DNA应答及ALT应答的关系　　 rs17401966与DNA应答具有相关性，rs17401966G等位基因携带者更易发生DNA应答，在共显性模型下(AGvsAA)，OR值为3.141（95％CI=1.826-5.403，P＜0.001），在显性模型下(GG+AGvsAA)，OR值为3.483（95％CI=2.045-5.932，P＜0.001）;在隐性模型下(GGvsAA+AG)，OR值为5.350(95％CI=1.176-24.347，P=0.030);性别、年龄为DNA应答的独立影响因素，吸烟和饮酒对DNA应答无影响。　　 rs17401966G等位基因携带者更易发生ALT应答，在共显性模型(AGvsAA)和显性模型(GG+AGvsAA)下，rs17401966与ALT应答具有相关性(OR=1.941,95％CI=1.231-3.063,P=0.004;OR=1.687,95％CI=1.089-2.615，P=0.019);性别是ALT应答的独立影响因素，年龄、吸烟及饮酒对ALT应答均无影响。　　 结论:　　 1、HLA-DQ多态性位点rs2856718与DNA应答无关联，与ALT应答具有相关性，rs2856718G等位基因可能为ALT应答的保护性碱基。性别是DNA应答和ALT应答的独立影响因素，女性更容易出现DNA应答和ALT应答。　　 2、HLA-DQ多态性位点rs9275572与DNA应答及ALT应答有关，rs9275572A等位基因携带者DNA应答和ALT应答的可能性增高，性别和年龄为DNA应答的独立影响因素，性别为ALT应答的独立影响因素。　　 3、GSPT1rs33635C等位基因是DNA应答和ALT应答的保护性因素，女性DNA应答和ALT应答的可能性更高。　　 4、尚未发现GSPT2多态性位点rs974285与DNA应答及ALT应答的关联。　　 5、KIF1Brs17401966G等位基因为DNA应答和ALT应答的保护性碱基，性别和年龄为DNA应答的独立影响因素，性别为ALT应答的独立影响因素。　　 6、经MDR分析，LAM治疗后的DNA应答和ALT应答不仅受到遗传因素的影响，同时又受到环境因素的影响，并存在基因-基因和基因-环境之间的复杂的交互作用。　　 第三部分，HLA-DP基因多态性与HBV感染的Meta分析　　 目的:　　 采用Meta分析的方法，对国内外不同人群的研究结果进行综合评价，以证实HLA-DP基因的rs3077和rs9277535两个SNP位点是否与HBV感染及HBV自然清除有关。　　 方法:　　 以“rs3077”为检索词，检索中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库及Pubmed数据库。共检索到7篇文献，以“rs9277535”为检索词，共检索到8篇文献，经过仔细阅读，共8篇文献纳入meta分析，其中，有两篇文献分别包括4个阶段的研究数据，共获得16个亚组数据，有12个亚组数据用于rs3077位点的meta分析，14个亚组数据用于rs9277535位点的meta分析。提取纳入文献的信息如下:第一作者、出版年、研究设计类型、受试者来自的国家和种族、病例组和对照组的定义和数量、提取DNA和分型的方法。文献未提供等位基因频率的，利用相应的基因型计算，分别提取rs3077和rs9277535位点的相关数据，本研究对rs3077和rs9277535位点的等位基因、共显性模型、显性模型及隐性模型进行了meta分析。计算优势比(OR)及其95％CI作为效应量。首先对纳入分析的原始文献进行Q检验，分析异质性，根据异质性检验结果，选择固定效应模型或随机效应模型求其效应合并值。用漏斗图和Eggers检验进行发表偏倚分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。所有数据用STATA10.0分析。　　 结果:　　 1、HLA-DPA1rs3077与HBV感染及HBV自然清除的关系　　 经meta分析，结果表明，携带HLA-DPA1rs3077A等位基因为HBV感染的保护性因素(OR=0.556，95％CI=0.527-0.586，P＜0.001)，携带HLA-DPA1rs3077A等位基因的个体感染HBV的风险降低，为携带HLA-DPA1rs3077G等位基因个体的0.556倍;在共显性模型、显性模型及隐性模型中结果相同（AGvsGG，OR=0.522，95％CI=0.485-0.561，P＜0.001;AAvsGG,OR=0.350,95％CI=0.311-0.393,P＜0.001;GA+AAvsGG,OR=0.478,95％CI=0.446-0.513,P＜0.001;AAvsGA+GG,OR=0.480,95％CI=0.429-0.536，P＜0.001)。携带HLA-DPA1rs3077A等位基因的个体感染HBV后自然清除的可能性高，发展成CHB的可能性降低(OR=0.654,95％CI=0.611-0.701,P＜0.001)，为携带HLA-DPA1rs3077G等位基因个体的0.654倍;在共显性模型、显性模型及隐性模型中结果相同（AGvsGG,OR=0.636,95％CI=0.577-0.702,P＜0.001;AAvsGG,OR=0.446,95％CI=0.383-0.520,P＜0.001;GA+AAvsGG,OR=0.595,95％CI=0.542-0.652，P＜0.001;AAvsGA+GG,OR=0.565,95％CI=0.489-0.652,P＜0.001)。　　 2、HLA-DPB1rs9277535与HBV感染及HBV自然清除的关系　　 meta分析结果表明，携带HLA-DPA1rs9277535A等位基因为HBV感染的保护性因素（OR=0.582，95％CI=0.556-0.609，P＜0.001），携带HLA-DPBIrs9277535A等位基因的个体感染HBV的风险降低，为携带HLA-DPB1rs9277535G等位基因个体的0.556倍;在共显性模型、显性模型及隐性模型中结果相同（AGvsGG，OR=0.542，95％CI=0.506-0.579，P＜0.00;AAvsGG,OR=0.371,95％CI=0.336-0.409,P＜0.00;GA+AAvsGG,OR=0.493,95％CI=0.462-0.525,P＜0.001;AAvsGA+GG,OR=0.516,95％CI=0.472-0.564，P＜0.001）。携带HLA-DPB1rs9277535A等位基因的个体HBV自然清除的可能性高，发展成CHB的可能性降低(OR=0.663，95％CI=0.626-0.702，P＜0.001)，为携带HLA-DPB1rs9277535G等位基因个体的0.663倍;在共显性模型、显性模型及隐性模型中结果相同(AGvsGG，OR=0.623,95％CI=0.570-0.681,P＜0.001;AAvsGG,OR=0.464,95％CI=0.412-0.523,P＜0.001;GA+AAvsGG,OR=0.577,95％CI=0.531-0.628,P＜0.001;AAvsGA+GG,OR=0.430,95％CI=0.390-0.474,P＜0.001)。　　 结论:　　 1、通过meta分析证实，携带HLA-DPA1rs3077A等位基因是HBV感染的保护性因素，携带此等位基因的个体感染HBV的风险降低，为携带rs3077G个体的0.556倍;而且还证明HLA-DPA1rs3077A等位基因为HBV自然清除的保护性因素，携带该等位基因的个体HBV自然清除的可能性更高。　　 2、通过meta分析证实，HLA-DPA1rs9277535A等位基因也是HBV感染和HBV自然清除的保护性因素，携带该等位基因的个体感染HBV的风险降低，为携带HLA-DPB1rs9277535G等位基因个体的0.556倍;携带HLA-DPB1rs9277535A等位基因的个体HBV自然清除的可能性更高，发展成CHB的可能性降低。