周德生教授治疗急性脑梗死的临床用药特点及活血荣络方对PC12细胞的保护作用初探

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目的:探讨临床急性脑梗死住院病历中的中医用药规律,总结常用药味,提炼高频用药组合和组方经验,评估经验方药对缺氧缺糖/复氧复糖后的PC12细胞活性的影响。为深入研究中医药治疗急性脑梗死提供参考,为临床中药运用的继承和创新提供思路与借鉴。方法:1.收集2018年1月1日至2019年9月30日期间湖南中医药大学第一附属医院脑病一科诊断为急性脑梗死的住院病历224例,总结其中所含中药方剂175首,使用Microsoft Office Excel 2007建立数据库;运用SPSS 25.0进行药物的频率分布和药物之间的聚类分析;IBM SPSS Modeler 18对用药进行关联规则分析;古今医案云平台进行药物的四气五味功效分析。2.采用PC12细胞缺血缺氧/复糖复氧模型,基于CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测实验筛选出最佳复糖复氧时间。后予以高、中、低浓度的活血荣络验方含药血清行相关干预,并予以空白血清、模型及正常组进行对照。应用CCK-8检测实验测定OD值并得出各组细胞损伤率。结果:1.⑴频数分析:在涉及的173味中药中排名前十(频率>50%)的依次为鸡血藤、石楠藤、玄参、川芎、生地、赤芍、黄精、石菖蒲、山楂、地龙。⑵聚类分析:得出以下主要聚类:乳香、没药、水蛭、鳖甲、茯神、石菖蒲;天麻、葛根、川牛膝;红花、桃仁、甘草、白芍;黄芪,党参,地龙,陈皮,法夏,白术,茯苓;莪术、三棱、鸡血藤、石楠藤、生地、黄精、川芎、赤芍、山楂、蒲黄、玄参。⑶关联规则:二阶关联规则中支持度前三的组合依次为鸡血藤→石楠藤,石楠藤→鸡血藤,玄参→石楠藤;三阶关联规则中支持度前三的组合依次为玄参+鸡血藤→石楠藤,生地+鸡血藤→石楠藤,川芎+鸡血藤→赤芍;四阶关联规则中支持度前三的组合依次为生地+石楠藤+鸡血藤→黄精,黄精+鸡血藤+石楠藤→生地,川芎+石楠藤+鸡血藤→赤芍。⑷性味归经:在用药总频次2569中四气出现频数最高的依次为温704、平655、微寒369;五味出现频数最高的依次为甘1114、苦1073、辛755;归经出现频数最高的依次为肝经1103,脾经817,肺经764;功效以滋阴清热、舒筋活络、活血散瘀为主要代表。2.⑴PC12细胞在缺糖缺氧3h后,损伤率在复氧复糖6h至24h时上升,在24小时时细胞损伤率最大为54.4%,24h至36h时下降。⑵PC12细胞缺糖缺氧3h/复糖复氧24h,活血荣络方含药血清中浓度组和高浓度干预组细胞损伤率降低,相比对照组细胞活性具有明显统计学差异。结论:急性脑梗死患者的中药临床应用阴阳兼顾,攻补兼施,以滋阴清热、舒筋活络、活血散瘀为主要治疗方式,而藤类药鸡血藤、石楠藤的大量运用配伍也是其特色,药物温补,平缓,性偏寒而主入肝经。活血散瘀药与舒筋活络药物的搭配,清热凉血药与滋阴活血药的搭配,都体现了气血阴阳并重,攻补兼施的组方思想。在配伍中兼顾药物性味,运用经典配伍,并进行创新性补充,在临床取得一定的症治效果,具有进行更深入挖掘的价值。而对于以“滋补阴血,化瘀通络”立法的活血荣络验方,在初步的细胞实验探索中,可从CCK-8结果得知其对PC12细胞的缺氧缺糖/复糖复氧损伤具有保护作用,且随浓度的增高,其作用有所增强,但其机制还待进一步分析。
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