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菊花(Chrysanthemum morifolium)是我国十大传统名花和世界四大切花之一,观赏与经济价值很高。土壤盐渍化及蚜虫危害严重影响菊花产量和品质,挖掘优异抗逆基因,并进行相关基因功能研究,是菊花抗性基因工程育种的前提。HSF转录因子参与了植物对多种非生物胁迫与生物胁迫的响应,目前菊花中关于HSF的基因克隆及功能分析报道较少。本研究从菊花中克隆了CmHSFA 和CmHSFB1基因,分析了其表达特性、转录激活功能、亚细胞定位特征;通过农杆菌介导的叶盘转化技术对两个基因进行遗传转化,并对其功能进行了初步研究,主要研究结果如下:1.同源克隆了CmHSFA 基因,开放阅读框(ORF)1077bp,与拟南芥中AtHSFA4a同源性较高;该基因定位于细胞核,具有转录激活活性且AHA结构是其转录激活区。CmHSFA4受盐胁迫的明显诱导,表现出组织特异性;对CmHSFA4超表达转基因菊花的耐盐性鉴定发现,两个转基因菊花株系较对照耐盐性明显提高。同时盐处理后发现转基因株系根、茎、叶中Na+含量均低于对照,而K+含量均高于对照,且CmHSFA4超表达提高了 CmSOS1、CmHKT2的表达,推测CmHSFA4可通过提高盐胁迫下转基因植株离子转运能力从而缓解盐离子毒害。H202及O2--含量測定及活性氧清除酶酶活測定发现,转基因菊花的活性氧含量低于野生型,相应的,其清除酶酶活性高于野生型,表明CmHSFA4转基因菊花有较强的活性氧清除能力。通过对离子转运及活性氧清除相关基因的表达特性研究发现,CmHSFA4超表达提高了活性氧清除过程中起到正调控作用基因Cm,SOD、CmAPX、CmCAT、CmHSP70和CmHSP90的表达,推測CmHSFA4可通过促进转基因植株活性氧清除能力的提高,从而增强植物的耐盐性。2.同源克隆了 CmHSFB1基因,全长为1154bp,其中开放阅读框(ORF)858bp,序列分析及系统进化树构建发现,CmHSFB1与拟南芥中AtHSFB1同源性较高;构建了该基因的亚细胞定位与酵母单杂交载体,亚细胞定位结果表明CmHSFB1定位于细胞核;酵母单杂交结果表明该基因不具有转录激活功能。CmHSFB1受到蚜虫取食的强烈诱导,且表现出组织特异性;对CmHSFB1转基因菊花接种蚜虫进行抗蚜性鉴定,发现两个转基因菊花株系有较强的抗蚜性。接种蚜虫后测定H202及O2-含量,发现与野生型相比,转基因株系中保持较高活性氧水平,活性氧信号路径相关基因CmRBOHD、CmRBOHF、CmOXI、CmZAT、CmHSP70、CmHSP90 的表达均保持较高水平,推测CmHSFB1接种蚜虫后促进转基因植株中活性氧信号产生及传递能力的提高,从而增强植物的抗蚜性。