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定位于Z染色体短臂长176 kb的PRLR与SPEF2串联重复基因为慢羽的分子基础,但其特异序列结构特征还不明确。本研究旨在明确两种羽型鸡胚主翼羽和覆主翼羽长度差异形成的胚龄、揭示重复基因PRLR与SPEF2的结构特征及其表达变化与主翼羽和覆主翼羽生长的调控关系,为慢羽羽型的分子调控机制提供理论参考。采集18至21四个胚龄的快羽和慢羽太行鸡的主翼羽和覆主翼羽,检测其长度变化;采集主翼羽和覆主翼羽羽髓组织以及肝脏组织分别提取RNA和DNA。利用PCR对样品进行羽型、性别和ev21整合的分子鉴定,分析鸡胚发育过程中胚龄、羽型、性别和ev21与翅羽长度变化的关系。半定量PCR检测PRLR两种剪接体的表达量以及PRLR与SPEF2基因头对头连接处共用区域拷贝数,利用RT-qPCR检测PRLR、SPEF2、BMP2和FST基因的表达量,分析随胚龄变化不同羽型、性别的鸡胚主/覆主翼羽的基因表达与长度变化关系,揭示176 kb重复基因结构特征。利用RACE获取PRLR基因mRNA的3’、5’末端序列,分析其结构特征。结果表明,胚龄、羽型和性别因素对鸡胚主翼羽和覆主翼羽长都有影响。随胚龄变化太行鸡主翼羽和覆主翼羽长度均有显著增长(P<0.05)。快羽鸡18-21胚龄的主翼羽均显著长于覆主翼羽和慢羽鸡的主翼羽和覆主翼羽(P<0.05);18-21胚龄的慢羽鸡主翼羽与覆主翼羽长差异不显著(P>0.05);18-21胚龄的快羽母鸡主翼羽均显著长于快羽公鸡(P<0.05),21胚龄的快羽母鸡覆主翼羽显著长于快羽公鸡(P<0.05),慢羽公母鸡的主翼羽和覆主翼羽均没有表现出性别差异(P>0.05);没有发现ev21整合对主翼羽和覆主翼羽长的影响(P>0.05);另外发现18～21胚龄快羽鸡主翼羽增长速度快于覆主翼羽,而慢羽鸡覆主翼羽增长速度快于主翼羽,在21胚龄时快羽鸡的主翼羽长于覆主翼羽2mm以上,而慢羽鸡的覆主翼羽略长于主翼羽。RT-qPCR检测分析发现,快羽鸡PRLR表达量显著低于慢羽鸡(P<0.05),21胚龄的表达量显著低于19和20胚龄(P<0.05),另外快羽母鸡表达量显著低于其他羽型性别组合(P<0.05)。快羽鸡FST基因表达量显著低于慢羽鸡(P<0.05),18、19和20胚龄表达量无显著差异(P>0.05),但是21胚龄表达显著低于18、19和20胚龄(P<0.05);快羽母鸡表达量最低,慢羽母鸡表达量最高。快羽鸡SPEF2基因表达量显著低于慢羽鸡(P<0.05),快羽母鸡表达量最低。BMP2基因表达只与羽类密切相关,其中覆主翼羽表达量显著高于主翼羽,快羽鸡覆主翼羽表达量显著高于主翼羽(P<0.05)。半定量PCR检测太行鸡毛囊组织中发现存在PRLRS1(2883 bp)和PRLRS2(2400 bp)两种剪接体,胚龄和性别对二者的表达均没有显著影响(P>0.05),但羽型影响PRLRS2的表达(P>0.05),表现在19胚龄慢羽鸡的PRLRS2表达显著高于快羽(P<0.05)。半定量PCR检测PRLR与SPEF2基因头对头连接处共有区域拷贝数,通过分析灰度值发现纯合慢羽公鸡:杂合慢羽公鸡:快羽公鸡:慢羽母鸡:快羽母鸡的拷贝数与预期比例4:3:2:2:1一致,因此推断慢羽重复基因是PRLR与SPEF2基因的部分区域(分别长182,798 bp和5944bp)形成尾对尾连接,重复区域长188.7 kb,而不是176 kb。综上,太行鸡18胚龄时主翼羽与覆主翼羽的长度差异、以及两种羽毛长度在快慢羽鸡间的差异已经凸现,快羽母鸡主翼羽生长速度最快。PRLR、SPEF2和FST基因在慢羽鸡的高表达、以及19胚龄的特异高或低表达,与慢羽鸡主翼羽和覆主翼的生长抑制、以及快慢羽鸡胚20胚龄后的主翼羽和覆主翼生长速度的改变有关;BMP2基因在覆主翼羽的高表达可能与覆主翼羽的分化生长有关,而与羽型无关。PRLRS2剪接体参与PRLR基因的羽型调控。慢羽PRLR与SPEF2串联重复基因长188.7 kb。