【摘 要】
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用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)和电化学方法研究免疫球蛋白G(IgG)和抗免疫球蛋白G抗体(Anti-IgG)。 对AFM成像生物样品,总结并探索其制备方法。结果发现,对于生物大
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用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)和电化学方法研究免疫球蛋白G(IgG)和抗免疫球蛋白G抗体(Anti-IgG)。 对AFM成像生物样品,总结并探索其制备方法。结果发现,对于生物大分子样品,用云母,尤其是活化云母,成像效果最好。 用AFM对IgG和Anti-IgG进行高分辨率成像。IgG和Anti-IgG分别稀释到1.6×10-4mg/mL和1.45×10-4mg/mL,分子可以较好分散,用AFM能够得到单分子形貌像。对不同的生物分子,最适浓度不同。对分子量大于3万道尔顿的蛋白,用AFM较容易得到清晰的单分子形貌像。 用AFM在空气中连续观察IgG,发现IgG逐渐聚集成不同的环形结构,而这种环形结构的亚单位是不同形状的IgG自组装体。 提出一种超敏免疫检测方案。通过AFM直接测量基片表面颗粒高度变化,来确定单个免疫复合物的形成,并将其应用到IgG/Anti-IgG系统中。 用IgG修饰过的探针对Anti-IgG分子进行垂直扫描,获得力-距离曲线,测得抗原-抗体的离解力约为1.6~4.1nN。 吸附有Anti-IgG的银柱电极、参比电极和已知浓度IgG溶液,组成高灵敏电位型免疫传感器。测得工作电极电位与IgG浓度线性相关,相关系数0.9644,响应范围0.2-6.4ng╱mL。
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