目的:子宫颈癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一。国内外科研人员普遍认为,子宫颈鳞癌的发生、发展、浸润和转移是一个多种因素共同参与的多步骤、多基因调控的复杂过程,其中包括原癌基因的激活,抑癌基因的失活和转运蛋白的功能失调等。　　 P型铜转运ATP酶β链(ATP7B)是铜离子转运蛋白家族成员之一。近年来有研究显示,ATP7B在乳腺癌、胃癌、食管癌、肝癌及子宫内膜癌组织中均有不同程度的高表达。提示ATP7B过度表达可能在恶性肿瘤的癌变过程中发挥促进作用。Kiss-1基因是Lee等[2]1996年发现的一种新的肿瘤转移抑制基因。它定位于染色体lq3-2,Kiss-1基因在细胞生长中起负调节作用,抑制增殖、促进细胞分化成熟,与衰老及引发多余细胞进入程序性细胞死亡有关。Skp2(S-phase kinase-associated protein2)是人类F-box蛋白家族成员之一,是泛素蛋白连接酶复合物(SCF)底物识别亚单位。一系列研究提示Skp2是一种潜在的原癌基因,它在细胞周期中起重要作用,特别是在G1/S期转变时,可通过参与调控因子的泛素依赖性蛋白水解途径来调控细胞周期。Skp2激活后即参与促进细胞增殖和细胞癌变过程,其在细胞生长中的作用与Kiss-1相反。　　 本课题采用组织芯片技术及免疫组化方法检测ATP7B、Kiss-1及Skp2在子宫颈不同程度病变组织中的表达情况。研究ATP7B、Kiss-1及Skp2与子宫颈不同程度病变的关系及临床病理意义。分析子宫颈鳞癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2三者的表达有无相关性。这对了解宫颈鳞癌的发病机制;预测宫颈鳞癌的浸润、转移;指导子宫颈鳞癌的临床诊断和治疗具有重要意义。　　 方法:　　 1选取河北省人民医院病理科2008年8月～2009年7月间手术切除及活检的子宫颈组织标本196例,制成组织芯片共得到175例有效样本,其中正常子宫颈鳞状上皮24例,CIN病变103例(CINⅠ34例,CINⅡ36例,CINⅢ33例),子宫颈鳞癌48例。　　 2应用组织芯片技术及免疫组化方法(SP法)检测正常子宫颈鳞状上皮、CIN组织及子宫颈鳞癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表达。　　 3采用SPSS16.0统计软件进行统计学处理,以α=0.05为检验水准,当P＜0.05时具有统计学意义。计数资料计算阳性率,样本率之间的比较采用卡方检验,两变量之间相关性检验采用Spearman等级相关分析。　　 结果:　　 1制备组织芯片及染色结果　　 按课题要求制作芯片4张(7×7),4个位点缺失,15个位点组织无意义。其他位点均可见足够的组织结构。共得有效样本175例,其中子宫颈鳞癌组48例,CIN组103例(CINⅠ34例,CINⅡ36例,CINⅢ33例),正常宫颈组织24例。HE染色均匀,无脱片、异位和皱折,显示组织着色良好。免疫组化染色,阳性定位清楚,背景干净,无掉片现象。　　 2 ATP7B在子宫颈上皮不同程度病变组织中的表达　　 从正常子宫颈鳞状上皮组织8.3％(2/24)到CINⅠ17.6％(6/34)、CINⅡ30.5％(11/36)、CINⅢ54.5％(18/33)再到子宫颈鳞癌75％(36/48),ATP7B的阳性表达率逐渐升高,其差异具有统计学意义(p＜0.05)。ATP7B在子宫颈鳞癌及CINⅢ、CINⅡ中的阳性表达率均高于正常宫颈鳞状上皮及CINⅠ组,差异有统计学意义(p＜0.05);子宫颈鳞癌、CINⅢ之间差异无统计学意义(p＞0.05);正常子宫颈鳞状上皮与CINⅠ之间差异有统计学意义(p＜0.05)。　　 3 Kiss-1在宫颈上皮不同程度病变组织中的表达　　 Kiss-1从正常子宫颈鳞状上皮91.6％(22/24)到CINⅠ79.4％(27/34)、CINⅡ61.1％(22/36)、CINⅢ54.5％(18/33)再到子宫颈鳞癌31.2％(15/48)阳性表达率逐渐降低。Kiss-1在子宫颈鳞癌及各级别CIN中的表达均低于正常子宫颈鳞状上皮,差异有统计学意义(p＜0.05);Kiss-1在子宫颈鳞癌中的表达明显低于各级别CIN(p＜0.05);各级别CIN之间,差异也有统计学意义(p＜0.05),随级别增加表达降低。　　 4 Skp2在子宫颈上皮不同程度病变组织中的表达　　 从正常子宫颈鳞状上皮组织0％(0/24)到CINⅠ44.1％(15/34)、CINⅡ63.9％(23/36)、CINⅢ89.9％(29/33)再到子宫颈鳞癌95.5％(46/48),Skp2阳性表达率逐渐增加,其差异具有统计学意义(p＜0.05)。Skp2在子宫颈鳞癌及CINⅢ、CINⅡ中的阳性表达率均高于正常子宫颈鳞状上皮及CINⅠ组,差异有统计学意义(p＜0.05);子宫颈鳞癌与CINⅢ之间差异无统计学意义(p＞0.05);正常宫颈鳞状上皮与CINⅠ之间差异有统计学意义(p＜0.05)。各级别CIN之间Skp2的表达也存在显著性差异(p＜0.05),随级别增加表达增强。　　 5子宫颈鳞癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表达相关性分析　　 子宫颈鳞癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表达之间均无显著相关性(p＞0.05),rATP7B与Kiss-1=-0.856,rATP7B与Skp2=0.361,rskp2与Kiss-1=-0.309。　　 6子宫颈鳞癌组织中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表达与年龄、肿瘤大小、分化程度、临床分期、淋巴结转移情况之间的关系　　 Skp2的表达与年龄、肿瘤大小、分化程度、临床分期、淋巴结转移情况之间均无显著相关性(p＞0.05)。ATP7B的表达与年龄、肿瘤大小、分化程度均无显著相关性(p＞0.05),ATP7B的表达与临床分期、淋巴结转移情况之间有显著相关性(p＜0.05)。Kiss-1的表达与年龄、肿瘤大小、分化程度无显著相关性(p＞0.05)。Kiss-1的表达与临床分期、淋巴结转移情况之间有显著相关性(p＜0.05)。　　 结论:　　 1用免疫组化方法检测ATP7B,其阳性表达率从正常子宫颈鳞状上皮到CIN再到子宫颈鳞癌逐渐增高,其差异有统计学意义(p＜0.05)。提示ATP7B可能在子宫颈鳞癌发生发展过程中起了促进作用。检测ATP7B可为子宫颈鳞癌、CIN的鉴别诊断提供参考。　　 2 Kiss-1阳性表达率从正常子宫颈鳞状上皮、CIN到子宫颈鳞癌逐渐降低,其差异具有统计学意义(p＜0.05)。证实Kiss-1的失活促进正常子宫颈鳞状上皮细胞的癌变。检测Kiss-1有助于对CIN病变进行更客观准确的分级及与子宫颈鳞癌的鉴别诊断。　　 3 Skp2的阳性表达率从正常子宫颈鳞状上皮、CIN到子宫颈鳞癌逐渐增高,其差异具有统计学意义(p＜0.05)。支持Skp2激活后参与促进细胞增殖和细胞癌变。检测Skp2同样有助于子宫颈鳞癌及CIN的鉴别诊断。　　 4子宫颈鳞癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表达之间无显著相关性。不支持它们在子宫颈鳞癌的发生、发展中起协同作用。　　 5 ATP7B在子宫颈鳞癌Ⅱ期患者中的表达高于Ⅰ期,其差异具有统计学意义(p＜0.05);在子宫颈鳞癌淋巴结有转移患者中的表达高于无转移的患者,差异具有统计学意义(p＜0.05)。Kiss-1在子宫颈鳞癌Ⅱ期患者中的表达低于Ⅰ期,差异具有统计学意义(p＜0.05):在子宫颈鳞癌淋巴结有转移患者中的表达低于无转移者,差异具有统计学意义(p＜0.05)。提示抑癌基因-Kiss-1的表达缺失以及铜转运蛋白的表达增加在子宫颈鳞癌的浸润和转移中起促进作用。对Kiss-1及ATP7B的检测有助于深入了解子宫颈鳞癌的浸润和转移机制,并且可为子宫颈鳞癌的临床治疗提供理论参考。　　 6组织芯片技术是一种经济,简便可行,高效稳定的技术方法,能满足相关科研课题和实际工作的需要。