论文部分内容阅读
目的本研究拟通过随机、自身交叉对照设计法,研究抗结核的固定剂量复合制剂复方利福平双释放胶囊(受试制剂)与市售制剂(参比制剂)中利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇的相对生物利用度,以评价复方利福平双释放胶囊药代动力学特性及与参比制剂是否生物等效,为临床合理用药提供理论依据,改善患者用药的依从性,减少耐药性的发生。方法招募20例健康男性志愿者,随机分为观察组与对照组,每组各10例。观察组服用12粒复方利福平双释放胶囊,对照组服用参比制剂,1周后自身交叉服用另1种制剂。单剂量组于服药前采空白血,服药后0.33、0.67、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、8、12、15、24和48h,各采集静脉血4mL,置肝素试管中,轻轻摇匀,立即离心,分取血浆,置-30℃冰箱保存；于服药后0-2、2-4、4-6、6-8、8-10、10-12、12-24、24-36、36-48h留尿,测量体积后,取50mL,置-30℃冰箱保存。多剂量组于服药前采空白血,连续给药六天后采集血浆样品和尿液,采血点及尿液收集时间同单剂量组,各剂量组生物样品均于测定前自然解冻进行生物等效性研究。根据FDA生物样品分析方法学指南,采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)测定利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的血药浓度,紫外可见分光光度法(UV-visible Spectrophotometry, UV)测定乙胺丁醇的尿药浓度,考察复方利福平双释放胶囊中各组分在健康人血浆样品的方法学特异性、精密度、准确度、线性、定量下限、生物基质效应、稳定性和回收率等。所测得的数据经3P97软件进行统计分析处理,采用非房室模型法评估各项药代动力学参数。结果本试验研究建立了人血浆中复方利福平双释放胶囊中各组分含量测定的定量分析方法,并进行在健康受试者体内的药代动力学研究及生物等效性评价。HPLC法测定人血浆中利福平的浓度,定量下限为0.24mg/L,线性范围为0.24-63.29mg/L。HPLC法测定人血浆中异烟肼的浓度,定量下限为0.257mg/L,线性范围为0.257-32.64mg/L。HPLC法测定人血浆中吡嗪酰胺的浓度,定量下限为0.32mg/L,线性范围为0.32-162.48mg/L。酸性染料比色法测定人尿中的盐酸乙胺丁醇,定量下限为25.02mg/L,线性范围为25.02-500.40mg/L。方法回收率和精密度均符合生物样品分析的要求。单剂量组结果：复方利福平双释放胶囊受试制剂和参比制剂的实测利福平的Tmax分别为(4.15±0.80)和(2.03±0.73)h,实测Cmax分别为(10.83±1.47)和(10.94±1.82)mg/L,梯形法算得AUCo-t分别为(89.77±15.43)和(71.78±14.01)mg-h/L, AUC0-x分别为(93.93±15.69)和(77.04±14.96) mg-h/L。以市售制剂为参比,复方利福平双释放胶囊中的利福平的生物利用度F1为(126.80±18.20)%；F2为(124.01±18.11)%,经方差分析和双单侧t检验证明,两种制剂中的利福平生物不等效,且Tmax亦有显著差异。实测异烟肼的Tmax分别为(0.77±0.51)和(0.79±0.46)h,实测Cmax分别为(4.44±1.45)和(4.22±1.42) mg/L,梯形法算得AUC0-t分别为(12.40±5.32)和(11.49±5.20) mg-h/L,AUC0-∞分别为(13.33±5.47)和(13.60±9.58) mg-h/L。以市售制剂为参比,复方利福平双释放胶囊中的异烟肼的生物利用度F1为(109.9±14.2)%；F2为(106.9±18.1)%,经方差分析和双单侧t检验证明,两种制剂中的异烟肼具有生物等效性。实测吡嗪酰胺的Tmax分别为(1.47±0.45)和(1.35±0.48)h,实测Cmax分别为(35.99±4.63)和(32.80±3.69)mg/L,梯形法算得AUCo-t分别为(555.46±76.81)和(481.70±74.03)mg·h/L,AUC0-α分别为(574.93±82.06)和(498.22±79.40)mg·h/L,以市售制剂为参比,复方利福平双释放胶囊中的吡嗪酰胺的生物利用度F1为(116.80±17.5)%,F2为(117.00±18.01)%,经方差分析和双单侧t检验证明,两种制剂中的吡嗪酰胺具有生物等效性。受试制剂和参比制剂的实测尿中盐酸乙胺丁醇的累积排泄率分别为(68.58±21.19)%和(67.69±18.70)%,以市售制剂为参比,复方利福平双释放胶囊中的盐酸乙胺丁醇的生物利用度F为(107.60±47.0)%。多剂量组结果：受试制剂和参比制剂利福平的实测Tmax分别为(4.60±0.37)和(1.91±0.66)h,实测Cmax分别为(9.73±1.82)和(9.35±1.31)mg·L-1,梯形法算得AUCss分别为(51.20±7.84)和(40.16±5.97)mg·h/L,Ka分别为(0.39±0.11)和(1.52±1.83)h-1,t1/2分别为(3.91±3.21)和(2.16±0.58)h；异烟肼的实测Tmax分别为(1.00±0.30)和(0.87±0.45)h,实测Cmax分别为(4.52±1.14)和(4.12±1.05)mg/L,梯形法算得AUCss分别为(12.30±5.75)和(12.28±2.05)mg·h/L,Ka分别为(5.55±7.76)和(4.54±5.54)h-1,t1/2分别为(1.77±0.77)和(1.57±0.20)h；吡嗪酰胺的实测Tmax分别为(1.58±0.58)和(1.47±0.52)h,实测Cmax分别为(39.75±7.30)和(44.10±10.97)mg/L,Ka分别为(4.13±5.67)和(3.81±1.43)h-1,t1/2分别为(8.48±0.74)和(9.14±1.18)h；乙胺丁醇的肾排速率分别为(1.15±0.55)和(5.74±10.24)h-1。结论1.本研究建立的复方利福平双释放胶囊各组分的定量分析方法可用于固定剂量利福平的药代动力学研究。20名健康志愿者口服抗结核固定剂量复方制剂复方利福平双释放胶囊后耐受性好,可在受试者体内可达到并维持有效的血药浓度。所有效能指标均符合药代动力学及生物等效性的试验要求。2.本试验对受试制剂和参比制剂进行的药代动力学及生物等效性评价,考察AUC0-,AUC0-t,T1/2,Cmax,Tmax等多个指标。阐明复方利福平双释放胶囊在人体吸收、分布、代谢及排泄的药动学变化特征,并得出结论认为2种制剂中的利福平生物不等效,异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇具有生物等效性。为该药申报提供资料,为指导临床制定安全、合理的给药方案提供科学依据,也为同类药物研发提供参考。