【摘 要】
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Bifidobacteriumbreve203在棉子糖为诱导物的培养基中培养,其无细胞粗酶液经NativegradientPAGE(4-15﹪线生梯度胶)后活性染色,表明只含有一种α-半乳糖苷酶.经硫酸铵分级沉淀
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Bifidobacteriumbreve203在棉子糖为诱导物的培养基中培养,其无细胞粗酶液经NativegradientPAGE(4-15﹪线生梯度胶)后活性染色,表明只含有一种α-半乳糖苷酶.经硫酸铵分级沉淀、DEAE-SeparoseFastFlow柱层析、GigapiteK-100S柱层析和sephadexG-150柱层析分离纯化后,酶蛋白在垂直板SDS-PAGE和NativegradentPAGE(4-15﹪线性梯度胶)中,均为一条带,证明已得到B.breve203α-半乳糖苷酶电泳纯.纯酶的比活为113.8units/mg,纯化倍数为64.7倍,得率为0.8﹪.酶的N-端氨基酸序列为NH<,2>-A-I-M-D-F-H-G-R-S-T.NativegradentPAG结果显示酶的分子量约为156KDα,SDS-PAGE显示单个亚基的分子是约为78KDa,由此表明该酶是一个双亚基蛋白质.该文的研究工作为研究α-半乳糖苷酶催化的转糖基作用及其区域选择性,酶法进行糖缀俣物的加工、处理奠定了良好的基础.
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