共价抑制剂药物通过亲电基团与靶蛋白中的亲核基团形成共价键的形式来使其快速失活而发挥作用。与传统非共价抑制剂药物相比有着使用量更低、副作用更小、药物作用时间更长、耐受性更好与可以解决某些难以靶向的通路等优点。近年来,共价药物在靶向EGFR、BTK等肿瘤治疗领域获得极大的成功,有着非常好的疗效。利用共价抑制剂的手段还解决了KRAS通路的成药问题,并且在新兴的小分子诱导蛋白质降解技术上也表现出了极大的潜力。故我们在本论文中采用此方法来设计并合成一系列靶向TEADs蛋白的共价化合物,并探究了其在体外与体内的生物学性质。Hippo通路在进化上高度保守,在发育过程中通过调整细胞微环境的变化来控制细胞之间的接触与增殖以及器官的大小,对细胞的生长和生存起着关键的作用,相关文献报道该通路是潜在的抗癌靶点之一。转录增强因子TEADs家族蛋白是该通路中下游关键的效应分子,其中心的自棕榈酰化口袋是理想的药物作用位点,故研究设计靶向TEADs的抑制剂可以为肿瘤的治疗带来新方案。在第二章中,我们利用计算机辅助药物设计的方式,将靶蛋白与化合物库分子进行虚拟对接,从中筛选到了Hit-12化合物,较之于被报道的氟酚酸活性提高了一倍,并验证了其在靶性。在进一步分析其在TEAD蛋白口袋中的作用模式后,于Hit-12化合物氨基上引入Micheal受体与半胱氨酸巯基结合,极大的提升了活性。在进一步的构效关系与药物化学改造中,我们发现活性最理想的化合物LY-P24(IC₅₀=190 nM±19 nM),并且巯基反应特异性与激酶选择性好。同时也是该靶点首个被报道的具有动物体内药效的化合物。在第三章中,我们采用骨架跃迁的方式,以LY-P24化合物骨架与棕榈酸作为参考对象,从化合物库中筛选到全新结构的LY-S01化合物,对TEAD1蛋白活性IC₅₀=613 nM,并具有TEAD1/3选择性。通过结构改造进一步加强了其与TEAD3蛋白酪氨酸残基的相互作用,我们发现了LY-S05化合物是目前首个靶向TEAD3活性与选择性最理想的化合物(IC₅₀=200 nM),对其他蛋白亚型的选择性是200倍以上。综上所述,靶向TEADs共价抑制剂LY-P24与LY-S05在体外实验与体内实验中,均展现了理想的活性与选择性,为靶向Hippo通路在未来癌症治疗中提供了全新的选择与方向。