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目的:构建ADAMTS-5siRNA慢病毒载体,研究慢病毒载体介导的siRNA对大鼠离体软骨细胞中ADAMTS-5基因表达的影响。方法:针对ADAMTS-5基因RNAi有效靶点构建大鼠pGCSIL-GFP-ADAMTS-5siRNA表达质粒,使用慢病毒包装系统,在293T细胞中进行包装生产含ADAMTS-5siRNA的慢病毒颗粒,然后转导入大鼠软骨细胞。通过real-time PCR和Westernblot方法检测转导后软骨细胞ADAMTS-5基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:成功包装大鼠含ADAMTS-5siRNA慢病毒颗粒。ADAMTS-5siRNA能顺利转入软骨细胞,转染率为80%;从Real-time PCR结果可以看出,大鼠关节软骨细胞中ADAMTS-5mRNA的表达量,干扰组明显低于阴性对照组,差异有显著性意义(P<0.05),Western blot结果显示, ADAMTS-5蛋白表达量,干扰组低于阴性对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:利用慢病毒载体把ADAMTS-5siRNA转入大鼠软骨细胞,使软骨细胞的ADAMTS-5基因沉默,为进一步阐明siRNA沉默ADAMTS-5基因防治骨关节炎的分子机制提供基础。