慢病毒介导的siRNA沉默ADAMTS-5在体外培养的大鼠软骨细胞中的作用

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:happytime3
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:构建ADAMTS-5siRNA慢病毒载体,研究慢病毒载体介导的siRNA对大鼠离体软骨细胞中ADAMTS-5基因表达的影响。方法:针对ADAMTS-5基因RNAi有效靶点构建大鼠pGCSIL-GFP-ADAMTS-5siRNA表达质粒,使用慢病毒包装系统,在293T细胞中进行包装生产含ADAMTS-5siRNA的慢病毒颗粒,然后转导入大鼠软骨细胞。通过real-time PCR和Westernblot方法检测转导后软骨细胞ADAMTS-5基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:成功包装大鼠含ADAMTS-5siRNA慢病毒颗粒。ADAMTS-5siRNA能顺利转入软骨细胞,转染率为80%;从Real-time PCR结果可以看出,大鼠关节软骨细胞中ADAMTS-5mRNA的表达量,干扰组明显低于阴性对照组,差异有显著性意义(P<0.05),Western blot结果显示, ADAMTS-5蛋白表达量,干扰组低于阴性对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:利用慢病毒载体把ADAMTS-5siRNA转入大鼠软骨细胞,使软骨细胞的ADAMTS-5基因沉默,为进一步阐明siRNA沉默ADAMTS-5基因防治骨关节炎的分子机制提供基础。
其他文献
在一个多民族的国家里,对少数民族实施双语教育已成为社会发展的必然趋势。占贵州彝族人口一半以上的毕节试验区,实施彝汉双语教育,既有必要性也有紧迫性。当前,毕节试验区彝
目的:探讨腹腔镜辅助教学在肝胆外科临床教学中的应用价值。方法:选择2015年1月-2015年6月在我院肝胆外科见习的本科生90人,依据随机数字表法随机分为观察组(48人)和对照组(4
目的探讨分析综合护理干预应用于手术治疗食道癌患者中的效果。方法选取我院2013年2月~2015年7月收治的手术治疗的食道癌患者150例作为研究对象,随机分成实验组和对照组各75
目的:比较Disc-FX系统经皮髓核钳夹、射频消融术与椎间盘内亚甲蓝注射术治疗椎间盘源性腰痛的临床疗效。方法:2010年3月至2011年2月我科收治的40例椎间盘源性腰痛患者采用随
目的:总结二尖瓣疾病伴功能性三尖瓣反流(Functional Tricuspid Regurgitation, FTR)的治疗经验,探索一种相对简便、快捷的指标,用于辅助判断是否需要在行二尖瓣置换术(mitral
<正>"婴儿最好的食物就是母乳,如果你的配方奶粉越接近本国母乳,越是好产品。"2016年高端奶粉逆势增长超过80%;2017年高端增长200%,总体增长超60%;2018年1-7月高端增长130%,
期刊
目的:建立高效液相色谱(HPLC)法和比色法两种方法用于测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中的抗氧剂亚硫酸氢钠,并比较两种方法是否存在显著性差异.方法:HPLC法色谱条件为采用Shoedx Su
目的:探讨杂交手术改善下肢动脉多节段闭塞缺血病变的临床疗效。方法:本文回顾性分析我院2010年6月至2012年6月期间采取DSA/MRA/CTA及血管彩色超声检查收治下肢动脉多节段闭塞
目的 探讨外消旋聚乳酸/神经生长因子(PDLLA/NGF)复合导管对大鼠坐骨神经缺损修复的量效作用,PDLLA/NGF复合导管中NGF的合适含量。 方法 wistar雌性大鼠24只,随机分为3组:单纯P
目的探讨二尖瓣直视成形术治疗二尖瓣关闭不全的临床效果,分析术前左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩末直径(LVESD)与术后出现左心室功能障碍的关联性。方法回顾性分析郑州大