时间分辨荧光免疫分析法是使用具有荧光寿命长、荧光发光的Stokes 位移大、特征峰非常尖锐等特点的稀土配合物作为标记物,可以通过延迟测量时间的方法,有效地消除背景荧光的干扰。因此时间分辨荧光免疫分析法具有比其它免疫分析方法更高的灵敏度。纳米荧光探针由于具有荧光发光强度大、光化学稳定性强以及颜色可调等特点也在生命科学中显示出广阔的应用前景。本论文的第一部分工作是以共价键合的方式将铕荧光配合物(BHHCT-Eu³⁺)键合在纳米级的硅胶微粒中从而制成具有强荧光性的纳米硅胶微粒,在对其性质进行了系统表征的基础上,探讨了其作为一种新型荧光探针用于生物标记及在高灵敏度时间分辨荧光免疫分析中的应用。使用纳米荧光微粒标记链亲合素,建立了人血清中乙肝表面抗原（HBsAg）的高灵敏度时间分辨荧光免疫测定法。该测定法的相对标准偏差小于10%,最小检测浓度为23 pg/ml,血清样品的添加回收率在80-110% 范围内,与直接以BHHCT-Eu3+为荧光探针所测定结果的相关性也很好。本论文还建立了以铕荧光标记物DTBTA-Eu3+为能量给与体,以有机荧光标记物Cy5 为能量接受体的竞争型均相时间分辨荧光免疫分析法用于人血清中三碘甲状腺原氨酸（T3）的定量测定。该方法用于人血清中T3 测定的最低检测浓度为0.23 ng/ml,相对标准偏差小于2%,血清样品的添加回收率在80-110%范围内,与用放射性免疫分析法所测定的结果有很好的相关性。另外,本论文还对一些可用于形成稀土荧光配合物的新型配位体的合成进行了尝试。