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本项目以稀有鮈鲫和泥鳅为对象，克隆了稀有鮈鲫和泥鳅的肌肉生长抑制素(myostatin，MSTN)基因，并对其表达模式进行了初步研究；同时，克隆了稀有鮈鲫β-肌动蛋白基因，为进一步研究鱼类肌肉生长发育调节机制下了基础。
肌肉生长抑制素是转化生长因子β家族成员之一，是动物肌肉生长发育的负调控因子，抑制肌肉的发育和生长。鱼类MSTN的研究将有助于了解肌肉发育及其调控机理，促进渔业生产和发展。
1．以稀有鮈鲫为主要研究对象，通过RT-PCR和RACE的方法，从稀有鮈鲫肌肉组织的SMARTcDNA文库中克隆出MSTN全长基因．与其它已知的MSTN比对，同源性非常高，达54％-97％，并基于已知的MSTN氨基酸系列构建了进化树。稀有鮈鲫的MSZN基因的cDNA全长2184bp，含有1128bp的开放阅读框，编码375个氨基酸。分析表明，其蛋白质具有两个典型的TGF-β蛋白结构域，一个是TGF-β前肽结构域；从第99位到第255位，共157个氨基酸。另一个是TGF-β结构域，是TGF-β家族基因的活性结构域，从第281位至第375位，共95个氨基酸。稀有鮈鲫的MSTN蛋白具有典型的RXXR蛋白酶水解位点(RIRR)，位于第263-266位；另有9个保守的半胱氨酸残基。信号肽预测发现该蛋白属于分泌性蛋白。采用RT-PCR方法进行了稀有鮈鲫MSTN基因的时空表达模式特征分析，结果表明，稀有鮈鲫MSTN在肌肉和眼睛中表达；而在其他被检测的部位如：脑、鳃、心脏、肠、卵巢、肝、精巢中未检测到。说明鱼类MSTN基因可能除了抑制肌肉生长发育以外，对眼的发育也有一定的作用。
2．以泥鳅肌肉cDNA为模板，采用RT-PCR方法克隆了泥鳅MSTN基因的主要片段：其长度为815bp，编码271个氨基酸残基。克隆的泥鳅MSTN基因已近完整的阅读框架(ORF)，包含了MSTN前肽结构域、MSTN功能结构域、保守的蛋白酶水解位点RIRR和7个保守的半胱氨酸残基等主要功能片段。泥鳅MSTN与鲤MSTN同源性高达94％，与斑马鱼MSTN同源性达92％。不同组织的RT-PCR分析表明该基因在肌肉中强烈表达，在眼中也有微弱表达，而在其他所检测组织(脑、鳃、心脏、肝脏、肠、精巢、卵巢)中未见表达。与稀有鮈鲫MSTN的表达模式一致。
3．β-actin基因是真核生物中普遍存在，是进化中高度保守的蛋白质家族，与一些管家基因一样，在物种内持续恒量表达，因而在很多需量化的实验技术，如RT-PCR、PCR、Northern杂交中被当作内参照。本研究采用RT-PCR方法从稀有鮈鲫肌肉组织中分离和克隆出β-肌动蛋白基因cDNA部分序列，长度为1029bp,编码343个氨基酸残基。序列分析表明，该cDNA序列与其他物种β-肌动蛋白基因同源性非常高。RT-PCR能够检出该基因在稀有鮈鲫肌肉、眼、脑、心脏、肝、肠、鳃、睥、卵巢等组织中广谱表达，在胚胎不同发育时期持续恒量表达。