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目的:组织工程支架作为外来物植入体内,在研究时不仅要具备优良的理化性能,还需关注支架与巨噬细胞之间的相互影响。聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)具有低免疫原性,纳米羟基磷灰石(Nano-hydroxyapatite,n HAp)具有良好的骨诱导性,聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)具有高亲水性,基于静电纺丝技术可制备出纳米级纤维支架,本实验通过构建PCL/PEG/n HAp电纺复合支架,探讨材料组份和构成比的改变对支架微观形貌、理化性能的影响,以及关注这类支架对巨噬细胞极化的影响,旨在为开发一类具有免疫调节功能的生物支架材料提供一个新的研究思路。方法:本研究采用静电纺丝技术制备了PCL、PCL/PEG、PCL/PEG/n HAp纳米纤维支架,通过扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)、傅里叶变换红外光谱仪(Fourier Transform infrared spectroscopy,FTIR)、水接触角测试仪及万能材料试验机对支架的形貌、孔径、表面化学、润湿性能及力学性能进行表征及比较,探讨了n HAp和PEG的加入对支架性能的影响。其次,在各组支架上分别接种小鼠骨髓间充质干细胞(Mouse bone marrow mesenchymal stem cells,m BMSCs)和小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(Mouse monocyte macrophage leukemia cells,RAW264.7),使用鬼笔环肽-DAPI染色后观察细胞黏附情况,利用活/死细胞染色及CCK-8法检测细胞增殖情况。随后,将两种细胞接种于各组支架上共培养,通过ELISA试剂盒检测细胞因子肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)及白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)的表达水平,综合以上结果来评价材料的体外细胞相容性以及材料对巨噬细胞极化的影响。结果:1.扫描电子显微镜显示PCL/PEG/n HAp纳米纤维支架的纤维表面光滑、尺寸主要分布在100~300nm,说明这三种材料共混所得的溶液可使用静电纺丝技术成功制备出纳米级复合支架。并且,纳米纤维直径随着PEG、n HAp的加入而增大,由PCL组96.06±36.13nm增加至PCL/PEG/n HAp组243.62±93.57nm。FTIR结果显示,相比于PCL组,PCL/PEG/n HAp复合支架的表面化学得到有效改善。万能材料试验机测试结果显示PEG和n HAp的加入显著提高了PCL基纳米纤维支架的拉伸强度,使支架具备更好的韧性和易加工性。水接触角测试结果显示添加了PEG的各组支架亲水性显著增强,水接触角由108°±3.80°显著下降到61.93°±2.64°。2.体外细胞实验表明,各组支架均具备良好的细胞相容性,RAW264.7及m BMSCs均可在支架上黏附增殖。支架上分别接种两种细胞的鬼笔环肽-DAPI染色结果显示,两种细胞均可以稳定黏附和生长在各组支架上。CCK8细胞增殖实验结果显示,支架接种RAW264.7单独培养组、支架接种m BMSCs单独培养组与支架接种两种细胞共培养组均显示出随时间稳定上升的细胞增值率,在各个培养组中PCL/PEG/n HAp支架组均具有最高的细胞增值率(P<0.05)。支架接种RAW264.7单独培养组进行活/死细胞染色,实验结果也验证了各组支架可以有效促进RAW264.7的黏附与生长。支架接种两种细胞共培养组ELISA检测结果显示,各组支架植入后TNF-α表达水平均显著低于对照组,各组IL-10表达量相对较高,PCL/PEG/n HAp组IL-10表达量高于PCL组、PCL/PEG组(P<0.05)。结论:本研究采用静电纺丝技术成功构建了一类PCL/PEG/n HAp纳米纤维复合支架,通过调整支架的组成成分和调节静电纺丝机的各项参数,优化了PCL基支架的理化性质,改善了支架的微观形貌、力学性能及亲疏水性。对各组支架分别接种m BMSCs及RAW264.7,体外细胞实验结果验证了PCL/PEG/n HAp支架组有利于细胞黏附增殖,具有良好的生物相容性,同时ELISA结果显示该组支架上培养的巨噬细胞表现出高水平IL-10表达量,提示PCL/PEG/n HAp支架有促进巨噬细胞极化的潜能,更有利于组织修复。