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宁夏中部干旱地区的压砂西瓜地连作障碍现象严重。西瓜枯萎病作为重要的土传病害,可导致西瓜大幅减产甚至绝收。采用生防菌对西瓜枯萎病病原菌——峡孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.Niveum,FON)进行生物防控已成为研究热点。课题组前期筛选获得拮抗菌——哈茨木霉(Trichoderma harzianum)M3菌株,发现其在压砂田中的生防效果较室内试验有所下降。由于连作土壤中西瓜根分泌物有所积累,因此本研究主要围绕西瓜根分泌物对哈茨木霉生防作用的影响进行探索,在检测西瓜根分泌物对M3菌株和FON生物学特性影响的基础上,明确西瓜根分泌物作用下M3菌株对FON抑菌能力的变化;进而探究M3菌株抑菌物质的分泌对根分泌物的响应。本研究结果为哈茨木霉生防菌株田间有效防治提供了理论依据。
研究结果表明:
1.采用平板培养法、液体培养法以及凹玻片法测定不同浓度西瓜根分泌物对哈茨木霉M3菌株和FON的各项生物学特性的影响,结果显示:无干扰情况下,M3菌株相较于FON在各项生物学指标上均占据优势;但是在添加西瓜根分泌物后,M3菌株更容易受其负面影响,影响幅度也更大;FON相较于M3菌株在西瓜根分泌物环境中表现为各项生物学特性指标更为稳定,对于西瓜根分泌物有更强的适应能力。可得出结论:在西瓜根分泌物环境中,FON相较于M3菌株更具有优势。
2.采用平板培养法、液体培养法以及凹玻片法比较西瓜根分泌物对哈茨木霉抑菌能力的影响,结果表明:M3菌株的菌丝生长、无菌发酵液和无菌发酵液的非活性蛋白组分对FON均有显著的抑制效果;在环境中添加西瓜根分泌物会导致M3菌株对FON的抑制率降低,随着西瓜根分泌物浓度增加,抑制率降低更加显著。环境中添加西瓜根分泌物,显著降低了M3无菌发酵液中几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性,且根分泌物浓度增加导致酶活性显著下降,对M3无菌发酵液非活性蛋白组分的抑菌作用也具有显著抑制作用。说明,高浓度的西瓜根分泌物对M3菌株的营养竞争作用、重寄生作用和抗生作用均具有显著抑制作用。
3.采用福林酚法测定了兴仁地区压砂瓜地的总酚酸质量分数,结果显示:在0~40cm土层中,总酚酸的质量分数随连作年限呈增加趋势,其积累水平与连作年限的关系呈线性,模拟方程为y=0.282x+O.4847,R2=0.984。
4.以土壤总酚酸质量分数为依据,采用模拟连作土壤盆栽试验,探索连作土壤环境中哈茨木霉M3菌株对FON的生防作用,并用自然连作土壤进行验证。结果显示,随着土壤中根分泌物浓度的增加,瓜苗病情指数呈现增加的趋势,M3菌株对FON的生防效果呈降低的趋势;自然连作土壤组与模拟连作土壤组的试验结果相似。由此说明,哈茨木霉M3菌株在连作土壤中的生防效果减弱与西瓜根分泌物的积累直接相关,并且在实验范围内,土壤连作年限越长,其生防效果受到的影响越大。
研究结果表明:
1.采用平板培养法、液体培养法以及凹玻片法测定不同浓度西瓜根分泌物对哈茨木霉M3菌株和FON的各项生物学特性的影响,结果显示:无干扰情况下,M3菌株相较于FON在各项生物学指标上均占据优势;但是在添加西瓜根分泌物后,M3菌株更容易受其负面影响,影响幅度也更大;FON相较于M3菌株在西瓜根分泌物环境中表现为各项生物学特性指标更为稳定,对于西瓜根分泌物有更强的适应能力。可得出结论:在西瓜根分泌物环境中,FON相较于M3菌株更具有优势。
2.采用平板培养法、液体培养法以及凹玻片法比较西瓜根分泌物对哈茨木霉抑菌能力的影响,结果表明:M3菌株的菌丝生长、无菌发酵液和无菌发酵液的非活性蛋白组分对FON均有显著的抑制效果;在环境中添加西瓜根分泌物会导致M3菌株对FON的抑制率降低,随着西瓜根分泌物浓度增加,抑制率降低更加显著。环境中添加西瓜根分泌物,显著降低了M3无菌发酵液中几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性,且根分泌物浓度增加导致酶活性显著下降,对M3无菌发酵液非活性蛋白组分的抑菌作用也具有显著抑制作用。说明,高浓度的西瓜根分泌物对M3菌株的营养竞争作用、重寄生作用和抗生作用均具有显著抑制作用。
3.采用福林酚法测定了兴仁地区压砂瓜地的总酚酸质量分数,结果显示:在0~40cm土层中,总酚酸的质量分数随连作年限呈增加趋势,其积累水平与连作年限的关系呈线性,模拟方程为y=0.282x+O.4847,R2=0.984。
4.以土壤总酚酸质量分数为依据,采用模拟连作土壤盆栽试验,探索连作土壤环境中哈茨木霉M3菌株对FON的生防作用,并用自然连作土壤进行验证。结果显示,随着土壤中根分泌物浓度的增加,瓜苗病情指数呈现增加的趋势,M3菌株对FON的生防效果呈降低的趋势;自然连作土壤组与模拟连作土壤组的试验结果相似。由此说明,哈茨木霉M3菌株在连作土壤中的生防效果减弱与西瓜根分泌物的积累直接相关,并且在实验范围内,土壤连作年限越长,其生防效果受到的影响越大。