目的利用小干扰核糖核酸分子(smallinterferingRNA，siRNA)抑制KATO-ⅢCD133~+胃癌细胞中CD133基因的表达，探讨CD133基因表达被抑制后对胃癌细胞增殖、侵袭、化疗药物敏感性、克隆球形成及裸鼠体内成瘤能力的影响。方法针对CD133mRNA设计并合成三段siRNA（siRNA1，siRNA2和siRNA3），通过对KATO-Ⅲ胃癌细胞转染和干扰效果的检测，从中筛选出干扰效果最佳的siRNA；利用荧光标记的siRNA（FAM-siRNA）转染后，通过激光共聚焦显微镜记数检测转染效率；经免疫磁珠分选的方法从KATO-Ⅲ胃癌细胞中分选出CD133+细胞亚群，并利用上述干扰效果最佳的siRNA对其进行转染，通过RT-PCR和（或）Western-blot方法检测CD133及EMT相关基因蛋白表达水平的变化，分别采用CCK-8法、Transwell侵袭实验、单克隆球形成实验和裸鼠皮下移植瘤实验等检测细胞生物学功能的改变。结果在KATO-Ⅲ和KATO-ⅢCD133+两组细胞中，FAM-siRNA的转染效率分别为（72±6）%和（88±8）%，三段siRNA序列中以siRNA3的干扰效果最佳；siRNA3可显著抑制KATO-ⅢCD133+胃癌细胞中CD133基因的表达，CD133表达被抑制后，KATO-ⅢCD133+胃癌细胞的增殖活性、侵袭、克隆球形成能力均显著降低，裸鼠皮下接种时移植瘤的重量及体积均明显低于对照组，而细胞对化疗药物5-Fu的敏感性显著增强，同时，EMT相关基因E-cadherin蛋白表达增高，而Snail和N-cadherin的蛋白表达降低。结论CD133在胃癌细胞的增殖、侵袭、化疗药物抵抗性、克隆球形成和裸鼠体内成瘤等方面具有重要作用，由此提示CD133可能是胃癌干细胞新型标志物，或可成为胃癌生物治疗的新靶点。