塞来昔布在外伤后癫痫模型大鼠中的应用研究

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目的1.建立外伤后癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)大鼠模型,观察环氧化酶-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对PTE大鼠早期癫痫的影响。为外伤后癫痫的防治寻找新方法。2.磁共振成像(MRI)分析塞来昔布对PTE大鼠脑结构及代谢影响,探讨MRI在PTE研究方面的应用前景。方法采用予大鼠右侧额叶皮质注射氯化亚铁的方法建立外伤后癫痫模型,将造模成功的大鼠,随机分为模型组、治疗组。另将假手术大鼠设为对照组,假手术大鼠是用同样方法向右侧额叶皮质注射等体积的生理盐水。以上每组各21只大鼠。治疗组的大鼠,给予Celecoxib(20mg/kg·d)灌胃,持续1周。模型组和对照组则给予等体积生理盐水灌胃处理。观察并记录3组大鼠的行为活动变化及癫痫发作情况。通过使用3.0TMRI观察大鼠脑结构及表观扩散系数(ADC)值的变化情况。普鲁士蓝(Perls)染色观察大鼠额叶皮质含铁血黄素沉积情况;苏木素-伊红(HE)染色观察额叶神经元损伤情况;尼氏(Nissl)染色观察海马神经元情况。采用免疫蛋白印迹(Western blot)法观察右侧额叶环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测右侧额叶白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果1.对照组大鼠无癫痫发作表现,而模型组和治疗组大鼠都出现了不同程度的癫痫发作表现。与模型组对比,治疗组的大鼠癫痫发作程度明显减轻(P<0.05)。模型组和治疗组大鼠右额叶均出现了铁离子沉积的损伤区,但治疗组病理损伤明显较轻,Perls染色阳性细胞数显著减少(P<0.05)。2.右侧额叶COX-2蛋白表达,模型组明显高于对照组(P<0.05),与模型组相比治疗组的COX-2蛋白表达明显减少(P<0.05)。右侧额叶IL-1β和TNF-α含量,模型组明显高于对照组(P<0.05);与模型组相比治疗组的IL-1β和TNF-α含量明显减少。右侧海马神经元数目,模型组少于治疗组和对照组(P<0.05)。3.MRI提示模型组的大鼠右侧额叶损伤最严重。右额叶损伤区周围皮质ADC值,第3天模型组低于治疗组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05),第7天模型组高于治疗组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。右侧海马区ADC值,第3天时各组大鼠无明显差异,第7天时模型组高于治疗组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.塞来昔布可显著减轻PTE大鼠脑损伤,有效降低癫痫发作程度,在PTE中有作为抗癫痫辅助药物使用的前景。2.MRI作为一种高效无创工具,为PTE的动物实验研究提供了新方法。ADC值对PTE病情发展判断有一定帮助,具有潜在的临床使用价值。
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