宫内发育受限大鼠出生后Ghrelin及其受体GHSR的表达与追赶生长的关系

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目的比较在妊娠期不同阶段进行不同程度食物限制建立宫内发育受限(IUGR)大鼠模型的方法,观察孕鼠妊娠期食物摄入限制对其分娩的小于胎龄(SGA)新生仔鼠的体格及重要器官发育的影响。方法将妊娠大鼠随机分为四组:三组限食组和一组对照组,限食组分别予妊娠全程中度、妊娠后期重度、妊娠中后期重度食物摄入限制。比较各组新生仔鼠的体格发育及重要器官的重量,以及活产SGA的发生率。光镜下观察大脑和胃粘膜的组织细胞形态学变化。结果妊娠全程中度食物限制法所致新生仔鼠SGA发生率最高(62.2%)。各限食组存活新生鼠体重、身长、尾长、脑、心、肺、肝、胃、脾、肾重量与对照组比较均有统计学差异(P<0.05)。限食组SGA仔鼠大脑和胃粘膜有明显的组织细胞形态学变化。结论妊娠全程中度食物摄入限制法可获得较高的SGA发生率和活产率。孕期食物摄入限制可导致新生仔鼠脑、胃等重要器官的组织形态学变化。目的了解胃底组织Ghrelin mRNA和蛋白表达与SGA仔鼠追赶生长的关系。方法采用妊娠全程中度、妊娠后期重度、妊娠中后期重度食物摄入限制法建立IUGR大鼠模型,获得SGA仔鼠。分别于0日龄、20日龄、40日龄三个时间点每组随机抽取仔鼠10只,测量并记录体重、身长、尾长,处死后获取胃底组织,采用实时荧光定量PCR法(real-time FQ-PCR)测定Ghrelin mRNA、免疫组织化学法测定Ghrelin蛋白在各组仔鼠胃底组织中的表达,比较0日龄限食组SGA、限食组AGA和正常对照组AGA仔鼠之间,以及20日龄和40曰龄SGA未追赶生长仔鼠、SGA追赶生长仔鼠和正常对照组AGA仔鼠之间是否存在差异。结果0日龄限食组SGA仔鼠胃底组织中Gherlin mRNA表达高于限食组AGA仔鼠和对照组AGA仔鼠(p<0.05);20日龄和40日龄的SGA未追赶生长仔鼠、SGA追赶生长仔鼠和对照组AGA仔鼠胃底组织中Gherlin mRNA表达无显著统计学差异(p>0.05)。0日龄限食组SGA仔鼠胃底组织中Ghrelin免疫阳性细胞的IOD值高于限食组AGA和对照组AGA仔鼠(p<0.05);20日龄SGA追赶生长仔鼠胃底组织中Ghrelin免疫阳性细胞的IOD值高于SGA未追赶生长仔鼠和对照组AGA仔鼠(p<0.05);40日龄时三者间则无显著统计学差异(p>0.05)。结论0日龄SGA仔鼠Ghrelin mRNA在胃底组织中表达增加,提示Ghrelin可能在宫内就开始参与IUGR胎鼠的生理调节或病理过程,或是宫内的营养状况和环境变化对胎鼠胃底细胞的生理功能产生了影响,使得Ghrelin mRNA表达上调;生后20日龄追赶生长SGA仔鼠胃底Ghrelin表达的变化进一步提示,Ghrelin可能参与了SGA早期的追赶生长调控,但其作用有待进一步阐明。目的了解下丘脑GHSR mRNA和蛋白表达与SGA仔鼠追赶生长的关系并探讨其临床意义。方法采用妊娠全程中度、妊娠后期重度、妊娠中后期重度食物摄入限制法建立IUGR大鼠模型,获得SGA仔鼠。分别于0日龄、20日龄、40日龄三个时间点每组随机抽取仔鼠10只,测量并记录体重、身长、尾长,处死后获取下丘脑组织,采用实时荧光定量PCR法测定GHSR mRNA、免疫组织化学法测定GHSR蛋白在各组仔鼠下丘脑中的表达,比较0日龄限食组SGA、限食组AGA和正常对照组AGA仔鼠之间,以及20日龄和40日龄SGA未追赶生长仔鼠、SGA追赶生长仔鼠和正常对照组AGA仔鼠之间是否存在差异。结果0日龄限食组SGA仔鼠下丘脑GHSR mRNA的表达低于限食组AGA和对照组AGA仔鼠(p<0.05);20日龄SGA追赶生长仔鼠下丘脑GHSR mRNA的表达高于SGA未追赶生长仔鼠和正常对照组AGA仔鼠(p<0.05);40日龄时SGA未追赶生长仔鼠、SGA追赶生长仔鼠和对照组AGA仔鼠之间下丘脑GHSR mRNA的表达差异无统计学意义(p>0.05)。0日龄限食组SGA、限食组AGA和对照组AGA仔鼠下丘脑中GHSR免疫阳性细胞的IOD值无显著性差异(p>0.05);20日龄SGA追赶生长仔鼠下丘脑中GHSR免疫阳性细胞的IOD值高于SGA未追赶生长仔鼠和正常对照组AGA仔鼠(p<0.05);40日龄时SGA未追赶生长、SGA追赶生长和对照组AGA仔鼠之间下丘脑GHSR免疫阳性细胞的IOD值差异无统计学意义(p>0.05)。结论限食组母鼠在妊娠期能量摄入不足使胎鼠下丘脑GHSR细胞发育受到影响,可能是导致新生SGA仔鼠GHSR基因表达下降的原因。出生后经过一段时间的生长和发育,部分SGA仔鼠下丘脑中GHSR的表达可得到恢复,且可能参与了SGA出生后的追赶生长过程。Ghrelin-GHSR系统调控体格生长,促进追赶生长的重要阶段应该是在青春期以前。
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