论文部分内容阅读
大叶紫薇（Lagerstroemia specious L.）为千屈菜科的落叶乔木,在菲律宾和亚洲其他国家被用来预防和治疗糖尿病。近年来,大叶紫薇降血糖活性作用受到广泛关注和研究。在我国广东和广西地区有较丰富的大叶紫薇资源,但对其降血糖成分的研究还不多。本论文研究我国大叶紫薇叶降血糖活性成分,对于阐明大叶紫薇叶降血糖作用机理和开发成功能食品有重要的学术意义和实践价值。首先采用3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型对大叶紫薇叶提取物的降血糖活性进行了分析。分别采用树脂分离和溶剂萃取将大叶紫薇水提取物和乙醇提取物分成了不同的级分,同时采用3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型对不同的级分进行降血糖活性测定,结果表明:乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物具有较高的降糖活性,化学分析表明,乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物中的主要成分为三萜化合物。建立了薄层-分光光度法测定大叶紫薇叶中总三萜含量和薄层-HPLC测定大叶紫薇叶中corosolic acid含量的方法。将大叶紫薇叶中甲醇提取物先采用薄层色谱进行分离,有效去除杂质,然后分别采用分光光度法测定总三萜含量和HPLC法测定corosolic acid含量。薄层色谱分离大叶紫薇叶中总三萜的适宜展开剂组成为V氯仿:V丙酮=4:1。分光光度法测定总三萜的适宜条件为:5 %香草醛醋酸溶液0.3ml,高氯酸1ml,60℃反应15min,测定波长542nm;HPLC测定大叶紫薇叶中的corosolic acid含量的适宜的条件为:LunaC18柱,流动相: V乙腈:V0.2%甲酸水溶液=60:40,流速1.0ml/min,检测波长204nm ,进样量10μl。两种方法都具有较高的精密度、准确性及可靠性。采用超声辅助方法提取大叶紫薇叶中的三萜化合物,探讨了提取条件对大叶紫薇叶总三萜和corosolic acid得率的影响,结果表明:超声辅助提取的最佳条件为:提取前浸泡120min,提取时间为25分钟,超声功率为200 W。总三萜和corosolic acid的得率分别为2.12%和0.71%。采用树脂吸附法对大叶紫薇叶中的三萜化合物进行了纯化。通过对5种不同类型树脂的筛选,发现HPD100树脂对大叶紫薇中总三萜类化合物具有较好的吸附与解吸性能。对HPD100树脂对三萜化合物的吸附性能进行了研究,得到了吸附等温线、动力学曲线和穿透曲线。树脂纯化后总三萜和corosolic acid纯化倍数分别达到2.08和2.15倍,总三萜和corosolic acid的回收率分别达到83.2%和86.3%。对树脂纯化的总三萜化合物,采用TLC分离和3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型筛选相结合的方法,筛选出了两种具有较高降血糖活性的单体化合物,通过采用标准品对照、UV、MS、1H NMR、13C NMR和DEPT-NMR进行结构分析,表明这两种单体化合物分