论文部分内容阅读
目的:用孕期全程低蛋白(10%蛋白)饮食法制造宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠模型,观察其生后生长发育的规律以及lipin在肝细胞表达的动态变化,探讨IUGR仔鼠发生胰岛素抵抗和高甘油三酯血症的机制。方法:选取健康三月龄Sprague-Dawley健康大鼠12只,按照雌雄1:1的比例置于同一笼中交配。受孕成功的孕鼠随机分为对照组和IUGR组。对照组母鼠自受孕后第1天开始给予21%正常蛋白饮食,而IUGR组母鼠自受孕后第1天开始给予10%蛋白饮食,建立IUGR仔鼠模型。两组仔鼠生后至21日的哺乳期内,均给予母鼠21%正常蛋白饮食喂养自由饮水。21天后将母鼠、仔鼠分笼,后继续给两组仔鼠21%正常蛋白饮食喂养自由饮水,喂养至56日。选择1日、7日、21日和56日作为观察的4个时间点,每个时间点每组6只仔鼠,测量仔鼠体重和头臀长,留取肝脏组织, RT-PCR法测定lipin1mRNA和lipin2mRNA表达水平,用Western blot检测肝组织中lipin2蛋白的表达。结果:1.两组大鼠生长动态比较:与对照组相比,1日龄IUGR仔鼠形体瘦小,体重,头臀长及其BMI均降低(p<0.05);7日龄体重和头臀长仍落后于对照组(p<0.05);经追赶生长,到21日时,体重身长无明显差异;到56日时IUGR仔鼠较对照组体重和头臀长降低(p<0.01),BMI比对照组升高(p<0.05)体态表现肥胖倾向。2.两组大鼠lipin1mRNA和lipin2mRNA表达水平比较:在四个时间点,两组lipin2mRNA表达比lipin1mRNA表达高(p<0.01);两组相比较,lipin1mRNA和lipin2mRNA均在1日龄时IUGR仔鼠较对照组降低,其差异均具有统计学意义(p<0.05),在7日和56日较对照组升高,其差异均具有统计学意义(p<0.05)。3.两组大鼠肝组织中lipin2蛋白的表达变化:在四个时间点,两组大鼠均在1日时是最高的,7日和21日较低,在56日又升高;与对照组相比,1日时IUGR仔鼠表达降低(p<0.05),在7日和56日表达升高(p<0.01)。结论:1、10%低蛋白饮食法建立IUGR大鼠模型,制模可靠,效果比较理想。2、IUGR仔鼠生长发育规律:IUGR仔鼠出生时体态瘦小,后出现“追赶生长”,体重身高与对照组仔鼠无明显差异,但经过青春期,成年鼠表现为生长发育落后,并表现出肥胖倾向。3、lipin基因表达蛋白参与糖脂代谢,lipin2在肝脏表达高于lipin1,对于IUGR大鼠,其表达在出生时低于对照组,此后一直高于对照组,其参与了IUGR大鼠的糖脂代谢紊乱的过程,进而为IUGR引起的成年代谢疾病防治提供理论依据。