新型溴代阻燃剂FM550在罗非鱼体内富集特征及其对甲状腺激素的干扰效应的初步探讨

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目的利用环境毒理学、分析化学及分子生物学等技术手段,从个体水平和分子水平揭示新型溴代阻燃剂FM550对罗非鱼的甲状腺激素干扰效应,阐明FM550的主要成分2-乙基己基-四溴苯甲酸(TBB)和2,3,4,5-四溴-苯二羧酸双(2-乙基己基)酯(TBPH))在罗非鱼体内积累富集特征,为新型溴代阻燃剂的安全评价提供理论基础。方法本研究选取罗非鱼作为受试生物,配制含不同浓度FM550(0、10、100和400ng/g)的饲料,通过饲料摄入FM550对罗非鱼染毒56d。利用高效气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测罗非鱼体内TBB和TBPH的含量,阐述其积累富集特征;使用全自动化学发光免疫分析仪、全自动生化分析仪和血细胞分析仪测定罗非鱼血清甲状腺激素(T3、T4、FT3、FT4和TSH)含量水平以及全血生理生化指标,研究不同剂量FM550暴露对甲状腺激素水平和生理生化指标的影响;使用试剂盒和酶标仪检测罗非鱼组织中的过氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷丙转氨酶(GPT)活性、丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽还原酶(GR)活性,探索FM550对罗非鱼的氧化应激反应的影响;使用高通测序技术以及mi RNA分析等方法,初步探索FM550暴露对罗非鱼甲状腺功能的分子作用机制。结果(1)TBB和TBPH均在罗非鱼体内蓄积,并且富集水平随着暴露时间的增加而升高;肝脏更易于积累和富集TBB和TBPH。(2)暴露56d后,FM550对罗非鱼的基础生长指标无显著性影响。高浓度的FM550可导致罗非鱼血清内的三碘甲状腺原氨酸(T3)含量水平降低,甲状腺素(T4)含量水平升高。随着FM550暴露浓度的增加,罗非鱼血清中的游离三碘甲腺原氨酸(FT3)含量水平呈降低趋势,而血清中的游离甲状腺素(FT4)含量呈现先降低后升高的趋势。(3)高浓度的FM550暴露会导致罗非鱼血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量降低,高密度脂蛋白(HDL-C)含量升高,低密度脂蛋白(LDL-C)的含量降低,但对全血生理生化指标无显著性影响。(4)暴露56d后,罗非鱼组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性随FM550的暴露浓度升高,呈现下降的趋势,组织中的丙二醛(MDA)含量以及谷丙转氨酶(GPT)活力随着暴露浓度的升高,呈现上升的趋势。(5)FM550的暴露会导致mi RNA片段的表达水平发生变化,可能对甲状腺合成通路,甲状腺激素信号通路等产生影响。结论FM550的主要成分TBB和TBPH能在罗非鱼体内积累,尤其更易在肝脏富集;FM550暴露能够影响罗非鱼体内甲状腺激素的转运,扰乱甲状腺激素水平,从而改变罗非鱼体内甲状腺激素的稳态水平,进而影响罗非鱼机体代谢;此外,FM550暴露对罗非鱼的氧化应激水平产生影响。
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