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α-葡萄糖苷酶抑制剂可以有效控制餐后血糖升高,在Ⅱ型糖尿病治疗中,被视为首选药物,目前临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂药物存在开发难、种类少、副作用大等问题,因此从天然产物中寻求安全、有效的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为热点研究。近年来,西青果粗提物已被多次证明具有高抑制α-葡萄糖苷酶活性,并且已有部分活性化合物从西青果中被分离纯化,本次研究采用活性跟踪的方式,对西青果进行系统分离,希望进一步认识西青果中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分。以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,高效液相色谱进行检测,建立α-葡萄糖苷酶抑制剂体外活性筛选模型。以活性跟踪方式对西青果中抑制α-葡萄糖苷酶成分进行研究,主要通过萃取、硅胶制备柱、LH-20制备柱和C18制备柱等分离手段,达到化合物分离纯化目的。在分离过程中以硅胶薄层色谱、HPLC分析结果指导柱分离。本次研究发现西青果中存在多种抑制α-葡萄糖苷酶活性成分,萃取所得组分经活性测试,抑制率结果为:乙酸乙酯相>水相>正丁醇相,石油醚相没有活性。对西青果乙酸乙酯相进一步抑制活性跟踪分离,第一次柱分离共得八个组分,经活性测试,在质量浓度为1.0mg/mL下,抑制率大于80%的组分有三个:Yb、Yc、Yh。Yb组分第一次柱分离后,得到化合物1和四个组分(Fr.b1、Fr.b2、Frb.3、Fr.b4),在质量浓度为0.1mg/mL下,四组分活性测试结果为:Fr.b1>Fr.b3>Fr.b2>Fr.b4;Fr.b1和Fr.b3因量少,放弃进一步分离; Fr.b2经硅胶柱、LH-20柱分离纯化后,得到化合物2。Yc组分经第一次柱分离后,得到化合物4和11个组分,在质量浓度为1.0mg/mL下,Fr.c7抑制率最高,Fr.c7经硅胶柱、LH-20柱、C18柱分离纯化后,得到化合物3和5。利用核磁(1H谱和13C谱)对5个化合物进行结构鉴定,分别为5-羟甲基糠醛(1)、arjunic acid(2)、arjunolic acid(3)、阿江榄仁素(4)和没食子酸甲酯(5),其中5-羟甲基糠醛、arjunicacid、arjunolic acid和没食子酸甲酯为活性单体,它们的半抑制浓度IC50值分别为21.20μmol/mL、2.97μmol/mL、0.82μmol/mL、13.76μmol/mL,化合物2和3的活性明显高于阿卡波糖(IC50=3.87μmol/mL),5-羟甲基糠醛首次从西青果中分离得到。