HPV16 E7蛋白免疫学特性研究及其单克隆抗体制备

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目的 HPV16是引起子宫颈癌等疾病的重要原因。在子宫颈癌患者中,90%以上的患者存在HPV感染,其中60%以上为HPV16感染。在HPV16感染的子宫颈癌细胞中,HPV16 E7蛋白存在持续性表达,细胞内HPV16E7蛋白与肿瘤抑制蛋白Rb蛋白结合,使原本结合于Rb蛋白的真核细胞转录起始因子E2F释放,引起细胞内多种蛋白的异常表达,使细胞突破生长检查点由G1期向S期转变,是引起起细胞恶性转化的重要原因,因此被认为是HPV16相关肿瘤特异性抗原,也被广泛地认为是HPV16相关肿瘤免疫治疗的理想靶点之一。 研究表明HPV16感染相关的临床诊断主要依靠以PCR技术为主的分子生物学方法,该方法具有设备条件要求高、监测结果假阳性率高、标本采集不方便、不易操作和推广等缺点,而免疫学诊断方法具有易于操作、标本采集本方便、检测敏感性高、特异性好的特点。另一方面研究表明,HPV16感染患者体内存在微量HPV16 E7抗体,细胞内HPV16E7蛋白存在持续性表达,它们可以作为有效的免疫学检测靶。 因此,本研究一方面拟探索HPV16早期蛋白E7的免疫学特性,为以HPV16 E7蛋白作为靶点的免疫学治疗性疫苗研究提供线索,为HPV16相关恶性肿瘤的免疫辅助治疗提供依据;另一方面,以原核表达的HPV16 E7-TRX融合蛋白为抗原,制备抗HPV16 E7单克隆抗体,为HPV16感染相关疾病的免疫学诊断提供线索。
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