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目的：建立骨肉瘤细胞耐阿霉素的细胞株，并采用多种实验方法筛选骨肉瘤亲代细胞(MG-63)和骨肉瘤耐阿霉素细胞(MG-63/ADM)二者的基因表达差异，以获得可能与骨肉瘤耐药相关的基因。 方法：采用化疗药物阿霉素，在药物浓度一定的情况下，逐渐增加药物作用时间诱导建立骨肉瘤耐阿霉素的细胞株(MG-63/ADM)，应用MTT方法和流式细胞仪凋亡检测的方法检测其耐药性变化情况，之后分别提取MG-63/ADM和MG-63的总RNA并并给予纯化、扩增，分别将其与含人类全基因组的寡聚核苷酸基因芯片(Human HT-12V4)杂交，比较人骨肉瘤亲代细胞(MG-63)和诱导建立的耐阿霉素骨肉瘤细胞(MG-63/ADM)的基因表达差异，应用Ⅱlumina Genome Studio统计分析软件挑选出具有统计学意义的表达差异的基因，最后用实时定量PCR技术对其中挑选的20个可能与骨肉瘤耐药性相关的明显差异基因进行验证；此外，应用实时定量PCR技术对目前研究与耐药性的产生最相关的经典耐药基因MDR1进行检测。 结果：使用Genome Studio软件，依据差异基因的筛选标准：实验组与对照组其中任何一组中为有效基因(p<0.01)，且实验组样本diffscore大于+20或小于-20即为差异基因；将耐阿霉素骨肉瘤细胞(MG-63/ADM)与亲代骨肉瘤细胞(MG-63)相比，发现符合该标准的差异表达基因为342个，其中上调219个，下调123个；在芯片结果中选取其中20个基因；14个基因上调，分别为CCL2、CCL26、CDH2、EDN1、GCLM、IER3、IL8、LIF、MMP3、MX1、SERPINB2、SERPINE1、SLPI和SOX9；6个基因下调，分别为COL3A1、DHCR24、FAM107A、HTRA1、MAP3K6和SYK，应用实时定量.PCR技术对其验证，结果与基因芯片结果基本一致，耐药细胞14个上调基因表达量分别是亲代细胞表达量的3.36、2.61、8.14、4.91、1.85、4.59、2.59、3.03、2.30、4.28、6.42、2.99、2.98和2.64倍，而耐药细胞6个下调基因表达量分别是0.50、0.69、0.37、0.52、0.56和0.56倍；同时，对MDR1(ABCB1)基因进行PCR验证，发现其在MG-63/ADM中的表达是MG-63的10.6倍。 结论：骨肉瘤多药耐药性的产生是复杂的多种基因参与的结果，本实验建立的耐阿霉素骨肉瘤细胞(MG-63/ADM)为研究骨肉瘤耐药性的产生提供了细胞模型，同时基因芯片中明显表达差异的基因为探究与骨肉瘤耐药相关的基因靶点提供了线索。