本文第一部分设计出一种高灵敏度、高选择性检测凝血酶的方法,它是基于两个适配体、两个报告分子、双重增强的SERS基底。在该检测方法中,一种硫醇修饰的凝血酶适配体（TBA29）通过Au-S键固定在金纳米颗粒（AuNPs）上。另一种硫醇修饰的凝血酶适配体（TBA29）通过Au-S键固定在Fe3O4@AuNP卫星结构上,两种适配体对凝血酶双重识别,诱导双适配体三明治复合物的形成,导致“热点”的形成,从而增强拉曼信号。并且本课题采用了两个报告分子的Fe3O4@Au-Au SERS探针,相对与传统的单个报告分子生物传感器检测蛋白质,其够有效地区分真阳性和假阳性。该生物传感器在25p M～1000p M范围内具有良好的线性,最低检测限为25p M。为了验证所提策略的可行性,我们将本检测系统应用于人血清中凝血酶的检测,回收率在89.71%-110.07%之间,变异系数低于11%。此外本检测体系有效的区分了癌症患者和正常人血浆中的凝血酶。Fe3O4@Au-Au SERS生物传感器为检测凝血酶提供了一种新颖、特异性强、灵敏高的方法,为其他血液标志物的检测提供了新的思路。在凝血级联反应中多种凝血因子和癌症的发生发展密切相关。然而血液状态的临床评价至今没有统一的标准,目前临床上传统的评估凝血状态的指标即凝血指标,因此本文第二部分采用了回顾性分析的方法,验证各项凝血指标和食管鳞癌预后的相关性。通过安徽医科大学第一附属医院病历系统调阅了两组受试者的基本临床资料及凝血指标,主要结局指标为无进展生存期和总生存期。结果表明:单因素分析显示,TNM分期（P＜0.001）,纤维蛋白原（P=0.046）,D-二聚体（P＜0.001）与食管鳞癌患者无进展生存期缩短存在相关性;TNM分期（P＜0.001）,凝血酶原时间活动度（P=0.031）,D-二聚体（P=0.001）,纤维蛋白原（P=0.013）与食管鳞癌患者总生存时间缩短存在相关。COX多因素分析结果显示:纤维蛋白原（P=0.017,HR=1.269,95%CI=1.043-1.544）TNM分期（P=0.011,HR=1.803,95%CI=1.143-2.842）是无进展生存期的独立预后因素。TNM分期（P=0.002,HR=2.12,95%CI=1.331-3.377）,D-D水平（P=0.028,HR=1.095,95%CI=1.01-1.187）和FIB水平（P=0.012,HR=1.294,95%CI=1.058-1.583）是总生存期的独立预后因素。以上结局表明高水平的纤维蛋白原与食管鳞癌患者的不良预后之间存在明显相关性,纤维蛋白原可作为预测食管鳞癌预后的独立危险因素。综上所述,本课题通过设计了一种基于SERS的Fe3O4@Au-Au双探针实现了在血清中检测凝血酶,并通过临床实际样例的回顾性分析,证明了纤维蛋白原和D-二聚体可用于食管鳞癌预后预测,提醒了临床医生需注意癌症患者凝血状态,以及为凝血酶的检测提供了一种新的检测思路。