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目的:糖尿病足(diabetic foot,DF)的发生对患者个人、家庭和社会均造成了严重的经济、心理和医疗负担,目前这已成为一个全球性问题。DF是糖尿病性神经病变、血管病变和感染等多种因素共同作用的结果。其中,血管病变发挥着重要作用。由于目前的研究结果多来源于动物实验,糖尿病患者血管的研究较少,所以,本实验取DF下肢截肢患者的足背动脉检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在糖尿病足截肢患者的缺血下肢的表达,探讨其在DF发生发展中的作用。
方法:选取糖尿病足截肢病人(DF group、DF组)的足背动脉为标本,并选取正常人足背动脉(control group、CG组)作对照。采用免疫组织化学法检测分析HIF-1α、VEGF、eNOS、CD34的蛋白表达。标本经10%甲醛固定,常规脱水石蜡包埋标本,做厚度3-4μm的连续切片,进行SP法免疫组化染色。兔单克隆抗体HIF-1α、VEGF、eNOS、CD34均购自美国R&D公司公司,HIF-1α、VEGF、工作浓度均为1:100,CD34为即用型。PBS液替代一抗做阴性对照。
结果:eNOS在CG组中正常表达,DF组中表达减弱(P<0.05);HIF-1α与VEGF蛋白在CG组下肢血管中微弱表达,DF组中呈表达增强(P<0.05);DF组中HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(P<0.05),HIF-1a和VEGF与MVD都成正相关(VEGF vsHIF-1α:r=0.700 P<0.01;MVD vs HIF-1α:r=0.780 P<0.01;VEGF vs MVD:r=0.775P<0.01))。
结论:1.光镜和电镜下观察的结果均证实,DF组患者血管存在明显的病理学改变。2、与CG组相比糖尿病足组eNOS的表达减弱,3、DF组HIF-1α与VEGF表达增强,与DF的发生发展密切相关。