论文部分内容阅读
目的:观察黄芪注射液、川芎嗪注射液合用对气虚血瘀证大鼠局灶性脑缺血后神经元Cx32表达及神经行为学的影响,并探讨由Cx32组成的缝隙连接与急性缺血性脑损伤之间的关系,及益气活血法在改善脑缺血损伤中的可能机理。
方法:100只清洁级、成年健康SD大鼠随机分为空白对照组(10只)和脑缺血组(90只)。脑缺血组又分为模型组、治疗组和对照组,每组又分为脑缺血1h、12h、24h3个时间点,每个时间点10只大鼠。多因素复合制作气虚血瘀大鼠中医症候模型,颈外动脉插入线栓法制备大鼠大脑中动脉急性局灶性脑缺血模型;治疗组、对照组分别于术前30min,术后每12h腹腔注射黄芪注射液(4.2mg/kg)、川芎嗪注射液(8.4mg/kg)合用,川芎嗪注射液(8.4mg/kg)单用,模型组腹腔注射生理盐水(10ml/kg);免疫组织化学法染色检测各组大鼠脑缺血后半暗带区神经元Cx32表达变化;Longa及Bederson5分制法于缺血后1h、12h、24h进行神经行为学评分。结果:大鼠局灶性脑缺血后,空白对照组仪有少量的Cx32阳性表达,模型组1h时间点Cx32阳性表达开始增加,12h时间点达高峰、24h时间点逐渐下降,模型组12h、24h时间点Cx32阳性表达较空白对照组明显增高(P＜0.01);黄芪注射液、川芎嗪注射液合用组(治疗组)及川芎嗪注射液单用组(对照组)1h时间点与模型组比较Cx32表达无明显变化,12h、24h时间点与模型组比较Cx32阳性表达则显著下降,且存在治疗组12h时间点Cx32阳性表达较对照组下降明显(P＜0.05):12h、24h时间点治疗组和对照组的神经行为学评分于明显低于模型组(P＜0.01),其中治疗组12h时间点神经行为学评分远低于同时间点的对照组(P＜0.05)。
结论:1.多因素复合法制作的大鼠中医证候模型成功,基本建立了气虚血瘀这一中医症候模型:2.局灶性脑缺血后神经元Cx32阳性表达于1h开始增加,12h达高峰,24h逐渐下降,同时伴有脑缺血后大鼠神经功能缺损即1h开始加重,12h进一步加重,24h不再加重,与梗死灶半暗带区Cx32表达有较好的一致性,提示脑缺血后神经元间、神经元与胶质细胞间信息交流可能加强,神经元Cx32可能参与脑缺血损伤的病理过程;3.黄芪注射液、川芎嗪注射液合用及川芎嗪注射液单用可降低大鼠局造性脑缺血后Cx32的表达,降低脑缺血后大鼠神经功能评分,同时存在黄芪注射液、川芎嗪注射液合用在降低Cx32表达及神经行为学改善方面优于川芎嗪注射液单用;
4.中医益气活血法或单纯活血法可能通过抑制脑缺血后神经元Cx32的过度表达,阻断缝隙连接间通讯,减少有害物质、凋亡信号的扩散和传递,降低缺血半暗带区迟发性神经元死亡的发生率及强度,减轻脑缺血损伤的程度;5.中医益气活血法在改善缺血性脑损伤的病理过程中优于单纯的活血法。