蝴蝶兰远缘杂交不亲和性及异源多倍体的创建

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shanwq1983
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蝴蝶兰是产业化最成功的兰花之一,远缘杂交和倍性育种是蝴蝶兰育种的主要方法,但目前有关蝴蝶兰远缘杂交不亲和机理及异源多倍体的创建研究报道较少。本研究以不同倍性(2×、3×、4×)蝴蝶兰,火焰兰、兰属兰花等为材料,研究了蝴蝶兰远缘杂不亲和性原因、真假杂种鉴定和异源多倍体创建技术。主要研究结果如下:  1、研究了蝴蝶兰远缘杂交不亲和性。结果表明,不同种属兰花与蝴蝶兰属杂交亲和性不同,其与蝴蝶兰杂交亲和性按高低依次为火焰兰属>万代兰属>兰属>树兰属>石斛兰属,其中,蝴蝶兰属为父本与火焰兰属、万代兰属的亲和性大于反交。在蝴蝶兰与墨兰杂交组合中,倍性对蝴蝶兰远缘杂交亲和性影响明显,不同倍性蝴蝶兰的属间杂交组合蕊腔闭合率之间有显著差异,二倍体杂交亲和性最高,四倍体次之,三倍体最低。  2、研究了远缘杂交不亲和性发生的细胞学机理。结果表明,(1)以墨兰为父本、不同倍性蝴蝶兰为母本的杂交组合中不存在柱头不亲和性,但在以墨兰为母本、不同倍性蝴蝶兰为父本的杂交组合中,不同倍性蝴蝶兰花粉在墨兰柱头上萌发数量不同,二倍体和四倍体蝴蝶兰花粉可以在墨兰柱头上萌发,但三倍体蝴蝶兰花粉不萌发或萌发数量很少;(2)蝴蝶兰和墨兰杂交存在花柱不亲和现象,花粉管在蕊柱中伸长慢,出现弯曲或末端膨大等现象;(3)蝴蝶兰和墨兰杂交存在子房不亲和,墨兰或蝴蝶兰花粉管可以伸入胚囊,但不能形成合子。  3、研究了不同倍性蝴蝶兰未减数配子的发生机制。结果表明,不同倍性蝴蝶兰均有未减数配子的发生,其发生频率依次为三倍体>四倍体>二倍体,不同倍性蝴蝶兰其未减数配子的发生机制不同:二倍体以融合纺锤体产生二分体,三倍体以融合纺锤体及不进行减数分裂Ⅱ产生二分体,四倍体以不进行减数分裂Ⅱ产生二分体;二倍体与四倍体以八字形纺锤体产生三分体,三倍体以八字形纺锤体及后期Ⅱ姐妹染色体重组产生三分体。  4、研究了蝴蝶兰真假远缘杂交后代的鉴定技术,并对后代进行了鉴定。结果表明,红花火焰兰×E35的杂交后代与其亲本在质量性状和数量性状上均表现出一定的差异。用ISSR分子标记技术鉴定了红花火焰兰×E27杂种后代。结果表明,ISSR可有效区分杂种中亲本带型差异,红花火焰兰×E27杂种后代为真杂种。  5、研究了蝴蝶兰异源多倍体的创建技术。结果表明,采用流式细胞仪可对丛生芽倍性进行快速准确鉴定,所有秋水仙素处理均都诱导出四倍体或嵌合体,其中秋水仙素浓度为0.1%,时间为7d的处理效果最好,四倍体诱导率为2%,而其他组合只诱导出嵌合体。  通过上述研究,初步研究了蝴蝶兰远缘杂交不亲和性机理;建立了形态学和ISSR标记鉴定蝴蝶兰远缘杂种真伪技术体系;通过秋水仙素诱导获得了异源四倍体资源,为进一步开展蝴蝶兰远缘杂交育种和不亲和性机理研究奠定基础。
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