无核葡萄是当前国际葡萄生产和消费的重要发展方向和趋势,而获得大粒优质并具有抗病性的品种一直以来是育种专家的目标。但无核葡萄的胚受精后常常在发育过程中败育,而传统的育种方法通常只能采用“有核×无核”方式进行杂交,育种周期长。目前借助胚挽救技术,直接采用无核葡萄作母本,可缩短育种周期并能有效提高杂种后代无核百分率。由于欧洲葡萄多数不抗真菌病害,而我国拥有丰富的野生葡萄抗病种质资源,并且比圆叶葡萄与欧亚种葡萄进行杂交具有更大的亲和性,因此,借助胚挽救技术结合欧洲葡萄中的无核等优良品质基因与我国野生葡萄特有的抗病基因,进行无核抗病葡萄育种和种质创新是一条有效的途径。此外,三倍体葡萄除具有多倍体植株的诸多优越性外,其果实无核或少核,因此利用三倍体的高度不育性可以开拓培育大粒无核葡萄新品种的途径。本研究采用胚挽救技术,主要进行了以欧洲种子败育型无核葡萄品种和抗病种质中国野生葡萄及其杂种为亲本的无核葡萄育种,以欧洲种子败育型无核葡萄品种、欧美杂种四倍体品种和我国特有的抗病种质山欧杂种北醇为亲本的多倍体葡萄育种,以及对胚挽救育种过程中影响因素的研究。在已有的工作基础上,进一步优化无核抗病葡萄育种体系,并获得了融常规杂交技术、胚挽救育种技术、流式细胞术和去壁低渗法染色体计数于一体的多倍体葡萄聚合育种技术体系。取得的主要研究结果如下:1.通过对胚挽救过程中激素添加、低温处理、抗氧化效果及不同倍性亲本的亲和性等影响因素的研究,初步认为胚珠培养阶段添加生长素IAA能明显提高胚萌发率,影响效果优于IBA,且IAA浓度1.5mg/L优于0.75mg/L;胚珠接种前对果穗5-8℃低温处理30天能够提高胚萌发率,并且明显优于接种后对胚珠5-8℃低温处理30天的效果;维生素C的抗氧化效果明显不及活性炭;不同倍性亲本的亲和性大小顺序为:四倍体有核×二倍体有核>二倍体无核×二倍体有核>二倍体无核×四倍体有核。2.以欧洲无核葡萄品种为母本,中国野生葡萄为父本,采用胚挽救技术进行了无核葡萄共9个杂交组合和3个自交组合的培养,获得无核葡萄胚挽救幼苗106株。利用无核基因特异SCAR标记对无核白×北醇及其11株杂交后代,底来特×雪峰及其10株杂交后代、红宝石×双优及其21株杂交后代共42株杂种幼苗的无核性进行早期检测,结果23株拥有该无核标记,无核率达54.8%,显著高于传统的育种方法。3.以欧洲葡萄无核品种红宝石无核、爱莫无核、黎明无核、底莱特、大粒红无核,山欧杂种北醇及欧美杂种四倍体品种藤稔、黑奥林为亲本,进行了7个组合的杂交,通过胚挽救技术培养获得杂种幼苗42株。采用流式细胞术和染色体计数对所得杂种后代进行了早期的倍性鉴定,有11株幼苗为三倍体,6株为四倍体,4株为非整倍体,为无核葡萄育种提供了新的种质,并获得了一种多倍体葡萄聚合育种技术体系。4.结合本课题组关于胚挽救幼苗移栽技术体系的研究,对7个组合的176株胚挽救幼苗进行移栽,共成活154株,平均成活率可达到87.5%。