抗牙龈卟啉单胞菌IgY的制备和体外研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanyewyew
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的将牙龈卟啉单胞菌作为抗原免疫蛋鸡,从鸡蛋中制备、纯化抗牙龈卟啉单胞菌卵黄免疫球蛋白(IgY),对其进行特异性鉴定,研究抗体滴度随免疫时间、温度、酸碱的变化,评价IgY的理化性质,并体外研究IgY对牙龈卟啉单胞菌的抑制作用。方法厌氧培养牙龈卟啉单胞菌国际标准菌株ATCC 33277,收集细菌,超声震碎至菌体完全破碎,离心,收集上清液,即为全菌可溶性蛋白抗原。罗曼母鸡隔离饲养至5月龄用于抗体的制备。以浓度为1mg/ml牙龈卟啉单胞菌全菌可溶性蛋白抗原1ml与等量福氏完全佐剂吹打混匀成油包水状注射剂,经皮下和肌肉多点注射免疫母鸡,共注射免疫4次,每次免疫间隔时间为10天。初次免疫后即开始收集鸡蛋,标记后4℃保存。提取、纯化免疫后不同时间的抗牙龈卟啉单胞菌IgY,二喹啉甲酸总蛋白定量法(BCA法)测定蛋白浓度,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析鉴定,间接ELISA进行IgY抗体效价变化和理化性质的检测,液体培养抑菌法检测特异性IgY对牙龈卟啉单胞菌的体外抑制作用。结果通过免疫诱导出的浓度为2.05mg/ml的特异性IgY,经SDS-PAGE检测,分子量与理论值一致;间接ELISA显示初次免疫后5天左右出现抗牙龈卟啉单胞菌IgY,免疫后50--55天到达高峰;抗体效价达到1:100 000以上;一个鸡蛋可以生产超过10mg的IgY,纯度高达95%;IgY对牙龈卟啉单胞菌具有特异性的抑菌作用,在浓度1.0 mg/ml时到达最大,抑制细菌生长率为47.21%。结论牙龈卟啉单胞菌全菌蛋白免疫产蛋母鸡可使鸡蛋产生高效价、高浓度的特异性IgY,该抗体稳定性好,能明显抑制牙龈卟啉单胞菌的生长。
其他文献
众所周知,在我国的电力工程中,监理制度与项目管理息息相关,并且他们都起着非常重要的作用。只有在具体的工程项目实施中把两者有机结合起来,才能更好的实现对整个项目过程的
<正>英国法院的司法管理是由英国司法部下属的行政机构——法院事务管理服务局(Her Majesty’sCourts Service)负责的。该服务局每年向英国国会提交的年度工作报告(Her Majes
<正>随着对传统盗版模式的不断打击,网盘已成为新的盗版隐匿点,无论版权方还是网盘平台,都必须找到防范网盘盗版的突破点8月11日上午,针对央视报道腾讯等举报360云盘涉黄的消
期刊
现代西方和东方的女性在家庭生活中有着不同的角色扮演和家庭地位,在现代西方,女性无论是在家庭中还是社会中,她们与男性有着几乎相同的地位。夫妻互相承担各种家庭支出,共同
在人类的生活环境中 ,许多现象都与气象具有密切的关系 ,所有研究与人类生活息息相关的大气现象及其变化规律的学科 ,称为环境气象学。人们迫切需要了解同自己日常生活有密切
在低渗透油藏中,往往需要采用深抽甚至超深抽工艺开采,而目前普通抽油杆不能完全适应工艺的需要.对钢质连续抽油杆性能进行了分析,重点介绍了钢质连续抽油杆深抽、防偏磨和提
【目的】了解云南省临沧地区抗病毒治疗失败的艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)患者(简称HIV/AIDS患者)的主要基因突变位点,耐药总体情况和耐药变化趋势,分析该地主要的耐药相关因素,指出HIV-1耐药防治的重点地区和人群,为指导当地临床抗病毒方案的实施提供一定的依据。【方法】采用In-House方法,对20112018年临沧地区抗病毒失败的1254例HIV感染者/AIDS患者血浆样本
烃类选择性催化还原NO是近年来国内外的一个研究热点,其关键技术在于开发新型高效的催化剂。本研究所制备的Cu/Al2O3催化剂与同类研究所制备催化剂相比,主要具有低温活性好、
随着作战资源的日趋丰富和对作战资源管控的要求,作战资源描述技术已经成为影响信息化战争中的一个重要研究领域。在对作战资源分类的基础上,采用资源描述框架(RDF)技术对作战
期刊