棘豆属植物黄酮测定方法与超声波辅助提取工艺研究

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棘豆属(Oxytropis)植物资源储量丰富,许多品种是蒙药、藏药的重要药材,多用于消炎、解毒、抗菌、镇静和镇痛等,这些生理活性与棘豆属植物中所含的黄酮类、三萜皂甙类和生物碱类等活性成分有关。目前对棘豆属植物的主要药用成分总黄酮的提取、测定及药理研究报道更少,影响了棘豆属植物的有效利用。因此,本文对棘豆属植物黄酮的提取、测定进行了系统研究,为其活性成分的利用及开发提供了技术支持。主要研究内容与结论概括如下:1.棘豆属植物化学成分系统预试验和黄酮专项预试验棘豆化学成分系统预试结果表明,急弯棘豆和冰川棘豆主要含有糖、多糖及其苷类,氨基酸、多肽和蛋白质,有机酸,酚类,鞣质、黄酮及其甙类,生物碱,甾体,萜类,香豆素及油脂等,未检出蒽醌、强心苷、氰甙和脂肪族硝基化合物。黄酮专项预试验表明,急弯棘豆和冰川棘豆含有黄酮类化合物,主要含有黄酮类、黄酮醇、二氢黄酮类以及具有邻二酚羟基,3-羟基、4-酮基或5-羟基的黄酮类化合物2.建立了棘豆属植物中总黄酮含量测定方法采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,通过对直接测定法、硝酸铝显色法及三氯化铝显色法三种不同方法的比较,结果表明直接测定法和硝酸铝显色法不适合急弯棘豆总黄酮的测定。而三氯化铝显色法测定时,样品和芦丁在274nm有共同吸收峰。精密度RSD为1.01%,重现性RSD为1.76%,稳定性RSD为1.25% (2h) ,平均回收率为98.35%,RSD为0.91%,急弯棘豆总黄酮含量17.90mg/g。该方法可作为测定急弯棘豆总黄酮含量较适宜的方法。3.探索了棘豆属植物总黄酮的超声波辅助提取工艺本试验以急弯棘豆总黄酮的含量为考察指标,在单因素试验的基础上,以超声温度、时间、乙醇浓度、料液比、超声功率为主要考察因素,通过正交设计试验优化超声波法辅助提取工艺,结果表明影响急弯棘豆超声辅助提取的主要因素依次为超声功率、温度、超声时间和料液比。最佳提取工艺条件:乙醇浓度在60%,提取时间为45min,超声波功率为800w,温度45℃,料液比为1:10,提取次数为2次。最高提取率为1.97%。4.测定了5种棘豆植物总黄酮含量采用上述建立的超声波辅助提取工艺提取5种棘豆属植物总黄酮,并用紫外分光光度法测定其含量,各棘豆植物总黄酮含量在9.7~33.85(mg/g)之间,总黄酮的含量由高至低依次为:甘肃棘豆、小花棘豆、急弯棘豆、黄花棘豆及冰川棘豆。
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