薯莨有效成分的提取分离及其对心脏收缩和内皮细胞凋亡的影响

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目的:从中草药薯莨中提取分离具有心血管作用的成分,寻找有心血管活性的先导化合物.观察其对离体心脏的作用和对氧化应激诱导内皮细胞凋亡的影响,为开发该中草药新的药理作用做初步研究;阐明薯茛作用的内涵,使它在理论源头有所创新.方法:用正相硅胶柱、反相硅胶柱、葡聚糖凝胶柱及吸附树脂柱层析方法分离纯化有效成分,用硅胶G板和ODS板层析检测.测定化合物的红外光谱、紫外光谱、质谱以及核磁共振谱以鉴定结构.用Langendorff离体心脏观察提取物对心脏的作用;用ECV304细胞观察化合物对H<,2>O<,2>诱导内皮细胞凋亡的影响.体外培养的人脐静脉内皮细胞ECV304按如下分组处理:(1)正常对照组;(2)H<,2>O<,2>损伤组;(3)药物组(化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ);(4)溶媒对照组;(5)阳性药物对照组(Genistein).用H<,2>O<,2>分别孵育内皮细胞4h和24h以损伤内皮细胞,MTT法检测各化合物对内皮细胞活性的保护作用.AO染色、流式细胞术测定各化合物对H<,2>O<,2>诱导内皮细胞凋亡的影响.结论:1.从薯莨中分离得到三个有效成分:化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ.2.化合物Ⅰ能拮抗氧化应激诱导的内皮细胞凋亡,对氧化应激所至内皮细胞损伤有保护作用.3.化合物Ⅱ和化合物Ⅲ可以增强大鼠离体心脏收缩力,对收缩频率无影响.
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