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目的:采用聚醚醚酮/氧化石墨烯/羟基磷灰石多功能复合生物材料,联合光热疗法,通过细胞实验与动物实验,检测材料的生物相容性与光热性能,探讨材料对骨肉瘤荷瘤裸鼠的肿瘤抑制能力,以期为治疗肿瘤提供一种有效方法。方法:1.选取3日龄SD大鼠第三代骨髓间充质干细胞(BMSCs)与多功能复合材料在含10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素的DMEM完全培养基37℃+5%CO2条件下培养。使用Live/Dead试剂盒对死细胞和活细胞进行染色,并使用荧光倒置显微镜进行观察来评估多功能复合材料的生物相容性。2.选取BALB/c雌性裸鼠(20-25 g,4周龄)根据材料植入情况随机分为空白组、P/G组、P/G/H组,近红外光(NIR)照射每2天照射一次(0.2 W/cm~2、0.3 W/cm~2、0.4 W/cm~2,808 nm,10 min),共照射14天,每2天监测一次裸鼠体重与生物学行为。照射期间观察裸鼠皮肤是否出现红肿、焦黑等情况,并监测两组材料的温度变化,选取合适光热功率,绘制两组材料的温度-时间变化曲线,研究多功能复合材料的光热性能。3.制备含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的DMEM完全培养基,将冻存的Saos-2人骨肉瘤细胞复苏、传代、扩大培养、计数并制备相应浓度的细胞悬液。4.选取BALB/c雌性裸鼠(20-25 g,4周龄),将制备好的Saos-2骨肉瘤细胞推注于裸鼠右侧腋下近背部皮下,建立裸鼠皮下肿瘤模型;当肿瘤体积增大到200 mm~3时行材料植入,根据分组将不同的材料植入肿瘤组织中心,缝合切口。术后观察切口有无红肿流脓等排异和感染现象。术后第三天激光照射组每2天每只裸鼠用近红外光照射肿瘤中心10分钟,照射期间监测肿瘤周围温度,共光热治疗14天。实验过程中每隔2天用游标卡尺测量肿瘤大小,计算肿瘤体积及相对肿瘤体积。于光热治疗第14天处死裸鼠,采集肿瘤组织并包埋、切片,行H&E染色。结果:1.将骨髓间充质干细胞与材料共同培养,通过荧光倒置显微镜观察细胞活性情况,结果显示镜下可见大量绿色荧光(活细胞),占主导地位,散在少量红色荧光(死细胞);对比不同培养组间细胞活性情况,P/G组与P/G/H组没有明显红色荧光增多情况,且绿色荧光较空白组增多。2.研究在三种不同的光热功率下材料的光热性能与光热安全性,光热治疗期间各组裸鼠体重无较大变化,生长发育正常,发现光热功率在0.3 W/cm~2时不会损伤裸鼠皮肤,同时能够升温至44~46℃,达到杀灭肿瘤所需温度。3.研究P/G/H与P/G两种材料在不同光热功率下体内光热转换能力,两组材料在裸鼠体内的近红外光成像图显示在120 s时温度均可升至40℃左右。经两组材料温度对比,发现P/G/H材料较P/G材料升温慢,在120 s时温度低1℃左右,两种材料均能达到42℃的光热治疗所需温度。4.通过光热治疗骨肉瘤荷瘤裸鼠,发现光热治疗组的肿瘤体积均小于非光热治疗组,光热治疗组内肿瘤体积对比:空白组>P/G组>P/G/H组;非光热治疗组与空白组+NIR第14天时肿瘤体积均增长至1400 mm~3~1500 mm~3左右,约为初始肿瘤体积的7倍,非光热治疗组内各组肿瘤体积无明显差异(P>0.05);通过计算相对肿瘤体积,发现P/G/H+NIR组与P/G+NIR组治疗后较治疗前体积缩小,其余各组肿瘤体积均增大。分析H&E染色结果发现P/G/H+NIR组与P/G+NIR组中蓝色和紫色染色区域较少,难以看到完整的肿瘤细胞。在无光热治疗的三组中,图中蓝色和紫色染色区域相似,骨肉瘤细胞结构完整;两个空白组间染色区域无明显差异。结论:1.P/G/H材料对正常细胞的生长无明显干扰,具有良好的生物相容性。2.P/G/H材料对近红外光具有良好的吸收能力,光热转换效率高,具备杀灭肿瘤细胞的光热转换能力。3.P/G/H材料能够有效的抑制骨肉瘤生长,对肿瘤细胞产生一定的杀伤作用,P/G/H材料相较于P/G材料,具有更好的骨肉瘤消融能力。