人粒细胞巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)在临床应用时因疗效差、副反应多和用药成本高,特别是在治疗粒细胞减少症和再生障碍性贫血时由于体内半衰期短,往往不能达到满意的治疗效果,极大地限制了临床的推广使用;同时每日注射的给药方式也给患者带来多方面的痛苦和不便。因此,对重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)进行改良性研究尤为必要。本研究采用40kDa的聚乙二醇共价修饰人粒细胞巨噬细胞刺激因子,通过增大其分子量,降低肾脏清除率,延长药物在体内的半衰期。通过调节偶联反应条件和纯化步骤,使获得一个PEG结合一个rhGM-CSF分子的单PEG- rhGM-CSF偶联物成为可能。通过基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、高效分子排阻层析(HPSEC)、SDS-PAGE、肽图等方法分析表明,产物纯度在95%以上,连接位点系在人粒细胞巨噬细胞刺激因子分子上单一位点偶联。采用60Co-γ射线照射小鼠建立辐射损伤动物模型,每周皮下注射一次治疗性给药,结果表明,rhGM-CSF的长效制剂PEG-GM对由于辐射损伤造成的动物外周血细胞(WBC和Gran)数量减少具有较快回升作用,加速粒细胞增殖与激活,使损伤脾细胞得到恢复的作用;对恢复辐射损伤细胞与骨髓造血细胞的功能有一定促进作用,可望开发成一种每周给药一次的长效rhGM-CSF制剂。