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背景和目的：心脏保存技术不完善是制约心脏移植开展的主要障碍之一。传统低温高钾保存液具有导致供心收缩功能不全、传导阻滞、异常跨膜离子流、细胞水肿等局限性，只能有效保存供心4-6小时。近年来钾通道开放剂制成的超极化心脏保存液在心肌保护方面达到甚至优于传统的高钾停搏液。最近有实验证明，选择性开放线粒体钾通道而非细胞膜钾通道具有保护供心心功能和减轻缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的作用。本研究旨在探讨选择性钾通道开放剂diazoxide改善长时间缺血供心心功能与减轻缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的关系。 方法：本实验采用Langendroff灌注模型，用KH液作灌注液。32只新西兰大耳白兔随机分成4组，每组8只：DIA组(KH液加入50μmol／L diazoxide)；STH组(St·Thomas液)；DIA+5-HD组(KH液中加入50μmol／L diazoxide及100μmol／L 5-hydroxydecanoic acid)；KH组(KH液)。兔心分别在相应组别的心脏保存液中冷保存(4℃)6小时。保存前分别测左室发展压(DP)、左室内压上升最大速率(+dp／dtmax)、冠脉流量(CF)、冠脉流出液中肌酸肌酶(CK)。以保存前DP、+dp／dtmax、CF的值作基数计算保存后的恢复率。记录四种保存液的灌注时间及心脏机械活动停止所需时间和电活动停止所需时间。分别测量保存后冠脉流出液中CK、心肌组织含水量和ATP含量、用流式细胞仪检测保存后心脏心肌细胞凋亡。 结果：在减轻心肌细胞凋亡、提高心功能及CF恢复率、能量贮存、丙二醛(MDA)含量方面DIA组明显优于STH组(P＜0.05)；在心脏停跳时间、心肌酶学、心肌组织含水量方面二者作用相当(P＞0.05)；STH组除在心脏保存液灌注时间、CF恢复率、心肌组织含水量方面与KH组无差异(P＞0.05)；其余方面优于KH组(P＜0.05)。5-HD可取消diazoxide的心肌保护作用，但不能取消其扩血管作用。数据如下：心脏保存液灌注时间(分)DIA组、STH组、DIA+5-HD组、KH组分别为1.49±0.34、2.22±0.29、1.75±0.29、2.37±0.39(P＜0.05)；心脏机械郑州大学2003年硕土毕业论文 二氮嗓超极化心麻液保护供体心功能和抑制心肌细胞凋亡相关性研究活动停止时间（秒）DIA组、STH组、DIA＋5－HD组、KH组分别为 ZI．3士 3．2、20．4士3＊、38．4士5．1、＊．5士6．9（＜0刀5）；心肋电活动停止时间（秒）mA组、8＊H组、mA＋5－＊D组、KH组分别为22．7土3．5、2二刀土二．7、＊ ＊士5．3、41．5土5．5（P＜0＊5）；DP恢复率（％）DIA组、STH组、DIA＋5爿D组、KH组分别为67．9士6．7、58石士6＊、23J士4＊、22．9士4．l（＜0＊5）；＋dp／dtmax恢复率（％）DIA组、STH组。m＊十－＊D组、＊H组分另为68．2士4．4、58士3．7、35＊土2石、37士3．1（P＜0刀5）：CF恢复率（％）DIA组、STH组、DIA＋5爿D组、KH组分别为 68．2土 4．4、58士3．7、35．2土2．6、37士3．1（P＜0．OSh保存前冠脉流出液中CK含量（山dD DIA组、STH组、DIA＋5－HD组、KH组分别为 144．10士20．03、144．52士13．18、142．80士13．25、15240士17．53（P＞ 0刀5＞ 保存后冠脉流出液中 CK含量（u／dl）DIA组、STH组、DIA＋5爿D组、KH组分别为203．26土15．9、ZIZ．29士19．82、491．83士17．53、485．16士14刀3（P功刀5）：保存后心肌组织AT P含量（umd／g）mA组、盯H组、m＊十－＊D组、KH组分别为4．4土0．28、3．1士0．27、2．28士0．41、1．93上0．42（＜0 ＊5）；保存后心肌组织含水量（％）DIA组、STH组、DIA＋5爿D组、KH组分别为78．48士0．24、78．50士0．21、78．62土0．34、78．56士0．28（P＞0．05）；保存后心 肌组织丙二醛含量（runol·g＼心肌湿重）DIA组、STH组、DIA巧－HD组、KH组分别为50．97士 8＊、71l士 11．8、93＊士 12．3、97l士 12．4（P、0．05）；保存后心肌细胞凋亡率 DIA组、STH组、DIA＋5．HD组、KH组分别为3．gi士0．32、6．28土0．72、10．68士0．92、10．gi士0．刀O＜0刀5卜经相关分析心功能恢复率和冠脉恢复率相关性无统计学意义 （P＞0刀5）。心功能恢复率和心肌细胞凋亡率相关性有统计学意义m刃刀01）：DP、＋dp／dtmax恢复率和心肌细胞凋亡率相关系数r分别为刀．983、刀．998。 结论： 1．Diazoxide停搏液很大程度上避免了高钾去极化停搏液的不足。 2．Diazoxide开放心肌细胞mitoK。。通道而非sarcK。p通道具有心肌保护作用；选择性mitoKATp通道阻滞剂50D可取消Diazoxide的心肌保护作用。 3．Diazoxide低温超极化停搏液灌注心肌，导致心脏迅速停搏，降低心肌能量消耗，增加心肌ATP贮存。 4．Diazoxide停搏液可减轻心肌细胞损伤，降低心肌组织脂质过氧化物（MDA）释放：MDA含量降低与Diazoxide减少氧自由基生成有关。 5．D眺OXldX停搏液可提高供心心功能恢复率：减少供心O肌细胞凋亡；心功能恢复率和心肌细胞凋亡率呈负相关。