巴贝斯虫广泛分布在世界的温带、热带及亚热带地区,对人类和动物健康造成严重危害。巴贝斯虫不同于弓形虫、疟原虫等顶复门原虫,其顶端复合体除了有微线体（Microneme）、棒状体（Rhoptry）之外,还有球状体（Spherical bodies）,但并未发现致密颗粒（Dense granules）的存在。本研究从我国分离的6株羊巴贝斯虫基因组DNA和c DNA中扩增SBP3基因全长序列,进行基因序列比对及结构特征与遗传进化分析,以阐述我国羊巴贝斯虫SBP3的基因学特征和各个虫株间的分类关系;并以其为靶标分子分别建立荧光定量PCR检测方法、巢式PCR检测方法和高分辨率熔解曲线分析方法,以满足不同检测目的的需求;利用原核表达系统获得羊巴贝斯虫未定种新疆株SBP3重组蛋白,并制备了其多克隆抗体,为评价SBP3作为免疫学检测候选抗原的潜力提供了生物学材料。主要研究内容和结果如下:1.从我国分离的6株羊巴贝斯虫基因组DNA和c DNA中扩增了SBP3基因的全长序列;利用生物信息学分析软件,进行基因序列比对、结构特征分析和遗传进化分析,结果显示,羊巴贝斯虫SBP3基因无内含子,羊巴贝斯虫未定种新疆株/敦煌株、莫氏巴贝斯虫宁县株/河北株和莫氏巴贝斯虫临潭株/天祝株的SBP3基因全长分别为3 195 bp、3 351 bp和3 348 bp;遗传进化分析结果显示,我国分离的六株羊巴贝斯虫可分为2个种,其中莫氏巴贝斯虫内可能存在2个亚种。2.以我国6株羊巴贝斯虫SBP3基因为分子靶标,通过序列分析,设计特异性引物,成功建立了可检测我国6株羊巴贝斯虫的荧光定量PCR、鉴别检测两种羊巴贝斯虫的巢式PCR和鉴别检测两个种羊巴贝斯虫及莫氏巴贝斯虫两个亚种的高分辨率熔解曲线分子检测方法。这三个分子检测方法均具有良好的特异性和敏感性,与感染羊的吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊无浆体均无交叉反应,对羊巴贝斯虫基因组DNA最低检测限为0.5 pg-10 pg。3.以羊巴贝斯虫未定种新疆株SBP3基因序列为模板,设计引物,扩增出不含信号肽序列的SBP3基因片段,构建原核表达载体p ET-28a-BXJSBP3,将其转入大肠杆菌BL21并进行诱导表达和SDS-PAGE分析。结果显示,大小为130 k Da的重组蛋白（r BXJSBP3）成功表达,同时在2、4、6和8小时表达量无明显差异;经超声破碎和可溶性分析,发现其主要以包涵体形式进行表达;对r BXJSBP3进行纯化以及浓度测定,获得浓度为200μg/m L的可溶性r BXJSBP3;以纯化的r BXJSBP3免疫试验兔制备多克隆抗体,对多克隆抗体进行Western blot分析,发现其能够特异性识别r BXJSBP3和羊巴贝斯虫未定种新疆株裂殖子天然SBP3蛋白。该研究为进一步评价SBP3作为免疫学检测候选抗原的潜力和功能的研究提供了生物学材料。