研究背景自然流产一般是指孕不足22周、胚胎或者胎儿体重不足500g时,已死亡的组织或其附属物从母体中排出。造成自然流产的原因很多,主要包括遗传因素、解剖因素、免疫因素、感染因素、内分泌因素及环境因素等,其中遗传因素是导致其发生的主要原因。遗传因素中的胚胎染色体异常目前被认为是已知最为常见的自然流产诱发因素。绒毛膜的绒毛细胞具有和胚胎组织相同的遗传信息,因此,通过对绒毛细胞进行染色体检查,可以了解胚胎细胞的遗传性状,不仅能对自然流产的病因作出遗传学的判断,还可以为染色体病的早期产前诊断提供理论依据。目前检测染色体异常的主要手段是细胞培养后行染色体G显带核型分析,这种传统的方法存在较多的局限性,例如：细胞培养成功率较低,只能检测培养后的中期细胞,难以做出嵌合体的诊断,无法检测一些微小倒位、重排、缺失和标记染色体等,因而不能完全满足当前的要求。荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)技术是在分子生物学、细胞遗传学和免疫学的基础上发展起来的一项新技术,其按照碱基互补配对原则,应用染色体特异性探针与待测DNA互补链杂交,通过观察荧光显微镜下信号的颜色和数目即可做出诊断,其检测快速、结果判读简单,对所检测的样本要求低,部分弥补了细胞遗传学方法的不足,显著提高了识别异常的能力,为检测染色体的数目及部分结构异常、确认标记染色体等研究提供了新的手段。胚胎染色体异常与孕早期胚胎停育关系密切,核型异常种类多样,如果能常规进行孕早期自然流产组织的染色体分析,将有助于提高异常核型胚胎的检出率。若有条件收集大样本、多区域的数据结果进行分析,将更有助于探讨自然流产的病因,为遗传咨询及优生优育提供指导。研究目的应用传统染色体核型分析及荧光原位杂交(FISH)技术对自然流产胎儿绒毛组织进行遗传学检测,分析导致自然流产发生的常见染色体异常的类型,探讨这；两种技术在检测自然流产绒毛组织染色体异常中的应用价值以及孕周、孕妇年龄、流产次数、助孕方式及其他相关因素与胚胎染色体异常的关系。研究方法收集2010年8月至2013年10月于山东大学附属生殖医院就诊的579例发生自然流产并以适当方式终止妊娠的孕妇的胎儿绒毛组织,其中449例绒毛组织进行细胞培养,培养成功的样本行G显带核型分析；228例绒毛组织应用FISH技术检测13、16、18、21、22、X、Y染色体数目异常。回顾性分析孕妇的临床资料,并对上述两种方法的检测结果进行总结、比较,采用统计软件SPSS19.0进行统计学分析。结果1.在449例行传统染色体核型分析的标本中,因绒毛量少无法培养3例,细菌污染92例,不明原因细胞死亡101例,其他培养失败115例,核型报告率30.73%,失败率69.27%。共检出异常核型17例,异常率为12.32%(17/138)。有98例标本后又运用FISH方法检测；2.在228例行FISH检测的自然流产标本中,共检测出异常标本86例,异常率为37.72%；有孕周记录的有效样本204例,在不同孕期的分布：早期妊娠(小于12周)、中期妊娠(12-23周)的样本数分别为196例、8例,各占比例96.08%、3.92%；前三位最常见的染色体数目异常为三体型46例(53.49%),三倍体12例(13.95%)和X单体5例(5.81%)；3.有14例行传统核型分析有结果后又行FISH检测,两种结果相比较有4例不一致。其余10例结果一致,一致率为71.43%；4.复发性自然流产患者绒毛染色体核型异常率为44.19%,高于初次自然流产的患者34.38%的异常率,既往流产次数多的患者绒毛染色体异常率有所升高,但差异不显著；采用IVF助孕的患者绒毛染色体核型异常率为31.36%,低于采用ICSI助孕患者44.44%的异常率,但二者差异不显著。结论1.染色体数目异常是导致自然流产发生的重要因素,对自然流产孕妇行绒毛染色体检测及相关遗传咨询是有必要的；2.自然流产组织中,排名前三位的染色体异常类型是常染色体三体型、三倍体和X单体；3.传统核型分析是检测染色体异常的金标准,但由于这种方法有细胞培养时间长、影响因素多、分析过程复杂、失败率高、重复性差等局限性,因此不能完全胜任对自然流产组织的检查要求；4. FISH技术在检测自然流产组织染色体异常时具有操作简单、快速及准确性、成功率高等优势,同时对所检测的样本要求低,是一种更适合临床要求的检测方法；5.既往流产次数多的患者其流产组织染色体异常率有所升高,但差异不显著；采用不同方式助孕的患者,其自然流产组织染色体核型异常率没有显著性差异。