CrGNAT调节莱茵衣藻耐铜毒害的初步研究

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随着社会的发展,重金属已经成为普遍存在的环境污染物,尤其对水体的污染已经成为全球性的问题。利用藻类生物修复和净化重金属污染水体,已经引起了国内外的广泛重视,并取得了一定的效果。研究藻类对重金属污染的修复机理,利用生物技术培育出对重金属有高耐受、高富集性的转基因藻类,是目前重要的生物学研究内容。组蛋白乙酰化可以在一定程度上影响基因转录表达活性,并可作为诱导转录因子间相互结合的信号,更进一步地完成对基因转录的调控。CrGNAT属于组蛋白乙酰转移酶的一个亚家族,其基因功能尚不明确。为了研究CrGNAT基因的功能,本文克隆了莱茵衣藻中CrGNAT的基因全长,构建了35S::CrGNAT过表达载体和35S::Anti-CrGNAT反义表达载体。通过玻璃珠转化法,各自筛选并鉴定出2个可以稳定性表达的遗传转化株系。本文选铜(Cu)作为重金属胁迫元素,对获得的转基因株系进行铜浓度的处理,并进行一系列的生理生化指标的分析测定。研究发现,在同一铜浓度的处理下,35S::CrGNAT过表达的转基因莱茵衣藻比WT对重金属有更强的耐受性,细胞生长数目和细胞内叶绿素含量都比WT高;而35S::Anti-CrGNAT反义表达的转基因莱茵衣藻对重金属毒害比WT更为敏感,在重金属处理下,细胞更容易死亡。另一方面,在基因水平上,经铜处理后,35S::CrGNAT过表达转基因株系的CrGNAT基因表达量要高于WT,而35S::Anti-CrGNAT反义表达转基因株系的CrGNAT基因表达量则低于WT。并且,基因表达量的高低与细胞受Cu毒害作用的大小呈正比,说明CrGNAT基因可以调节莱茵衣藻对Cu胁迫的耐性。
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