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【目的】探讨OSI-027及其联合自噬抑制剂对慢性粒细胞白血病细胞株K562的生物学影响及可能的机制。 【方法】常规方法复苏、传代培养待细胞进入对数分裂期后用于实验。1.药物对K562细胞生物学影响的初步观察：空白对照组细胞行正常培养，OSI-027处理组以0.1、0.5、1、5、10、20μmol/L浓度的OSI-027处理细胞，雷帕霉素（RAPA）处理组以1、5、10、20、50、100 nmol/L浓度的RAPA处理细胞，收集处理后的24h、48h、72h细胞，以MTT比色法测定细胞增殖抑制率及半数抑制浓度（IC50）；倒置相差显微镜观察细胞生长状况；光学显微镜观察常规瑞氏染色后细胞形态变化。2.药物对K562细胞生物学影响的机制研究：细胞分为空白对照组（正常培养）、OSI-027、RAPA、氯喹（CQ）、OSI-027联合CQ和RAPA联合CQ处理组，收集处理后24h、48h、72h细胞，AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；PI单染流式细胞术检测细胞周期分布；透射电镜观察亚细胞结构变化；Western Blotting检测细胞中BCL-2、Beclin1、HIF-1α蛋白的表达情况。 【结果】1.MTT结果显示，OSI-027对 K562细胞有明显增殖抑制作用，且抑制作用呈剂量-时间依赖性，其IC50为6.104μmol/L；RAPA对K562细胞有一定的增殖抑制作用，IC50为132.640nmol/L。2.细胞生长状况观察显示，与对照组相比，OSI-027处理组出现了细胞数量减少、颜色变暗、抱团生长和破碎等现象，随药物浓度升高和时间延长，上述变化更加明显；RAPA处理组未出现明显的生长变化，仅见细胞数量略微减少等改变。3.细胞形态观察显示，与对照相比，OSI-027处理组细胞边缘破碎，体积缩小，胞质中出现空泡，核仁消失，核染色质粗糙；RAPA处理组未出现明显的形态变化，仅在作用72h时，见细胞核染色质变得较粗糙。4.细胞凋亡检测显示，OSI-027可诱导K562细胞凋亡，且效应高于RAPA作用组（P<0.05），当OSI-027联合 CQ作用时主要诱导细胞坏死，坏死率随处理时间延长而升高，72h达29.57±1.80％；RAPA对细胞凋亡影响不大，当其联合CQ作用时可诱导细胞凋亡，且凋亡效应强于RAPA单独作用（P<0.05）。5.细胞周期检测显示，OSI-027及其联合CQ可影响K562细胞的周期分布，使细胞周期阻滞于G0/G1期，且随作用时间延长阻滞效应越明显，以OSI-027联合CQ作用时尤为显著；RAPA联合 CQ影响细胞周期分布较其单独作用明显，可使周期阻滞于S期。6.亚细胞结构观察显示，与对照相比，经CQ处理后的K562细胞形态较完整；OSI-027处理组可见细胞胞膜不完整，细胞器减少，胞核受损、空泡化，核膜、核间隙增厚，染色质稀疏；OSI-027联合CQ处理组细胞受损最严重，见胞膜破坏，胞质内细胞器严重丢失，细胞核破裂、空泡化，核膜受损，核内染色质基本消失。7.蛋白相对表达检测结果显示，与同时间段对照相比：① OSI-027作用早、中期，可上调BCL-2蛋白表达(P<0.05)，后期则下调该蛋白的表达(P<0.05)，当其与 CQ联合作用时则下调 BCL-2蛋白的表达(P<0.05)；RAPA在作用早、中期，也可上调BCL-2蛋白表达(P<0.05)，当其联合CQ作用时，则下调该蛋白的表达(P<0.05)。②OSI-027可在作用中后期，上调Beclin1蛋白的表达（P<0.05），当其与CQ联合作用时，则下调该蛋白的表达(P<0.05)；RAPA在作用后期可上调Beclin1蛋白的表达（P<0.05），当其与CQ联合作用时则下调该蛋白的表达(P<0.05)。③OSI-027可使HIF-1α蛋白表达下调(P<0.05)，当其与 CQ联合作用时，则大幅度下调 HIF-1α蛋白的表达(P<0.05），以作用后期最明显；RAPA联合CQ作用可下调HIF-1α蛋白的表达(P<0.05)，单独RAPA对其表达影响不大。 【结论】1. OSI-027可显著抑制K562细胞的增殖，且抑制效应呈剂量-时间依赖性，当其与CQ联合作用时可更显著的导致细胞死亡。2. OSI-027对K562细胞的增殖抑制作用较RAPA对其作用显著。3. OSI-027对K562细胞的增殖抑制作用可能与诱导细胞凋亡，阻滞细胞周期于G0/G1期，下调mTOR信号通路下游靶蛋白HIF-1α的表达等因素有关。