湖南烟草靶斑病病原鉴定与生防菌筛选

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烟草靶斑病近几年在湖南部分烟区发生流行,由立枯丝核菌引起,一旦发病,扩散极快,给烟农造成较大的经济损失。本研究采集湖南五个烟区烟草靶斑病样品,分离病原菌,进行分子和融合群鉴定,测定其致病力,并从烟草根际土壤中筛选出了2株立枯丝核菌拮抗细菌。结果如下:(1)从湖南永顺县、慈利县、龙山县、石门县和张家界市采集了烟草靶斑病病叶,利用组织分离法从病叶上分离纯化得到了13株病原菌,利用科赫氏法则法则验证后分子检测,构建系统发育树,确定该病原菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn),利用对峙培养法对分离得到的13株R.solani融合群进行测定,判定这13株R.solani属于融合群AG-3的四个融合亚群,其中分离自永顺的5株菌判定属于一个融合群;LS1、ZJJ和SM属于同一个融合亚群;LS2、CL1-1和CL1-2属于同一个融合亚群;CL2-1和CL2-2属于同一个融合亚群。(2)将13株R.solani接种到烟叶上,进行致病性测定:菌株YS1的致病力最强,接种烟株的发病率最高,为76.67%;且侵染烟叶病斑的平均直径(AD)最大,为12.08mm;其病情指数最高,为72.22。菌株SM的致病力最弱,接种的烟株发病率最低,为36.67%;且侵染烟叶病斑的AD值最小,为1.97cm;其病情指数也最低,仅为13.70。交互致病性研究发现:玉米纹枯病病原菌菌可以侵染烟草,烟草靶斑病病原菌不能侵染玉米;水稻纹枯病病原菌不能侵染烟草,烟草靶斑病病原菌同样不能侵染水稻。(3)从烟草根际土壤中筛选出了2株烟草靶斑病拮抗细菌GT-5和GT-6,它们能明显抑制烟草靶斑病病原菌菌丝的生长,菌株GT-5对烟草靶斑病病原菌的抑菌率为63.98%,GT-6为50.07%。经分子鉴定,GT-5为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),GT-6为荧光假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。
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