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目的：低氧预适应骨髓间充质干细胞可以提高其移植后在靶组织的存活率。人骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性脑卒中很大程度上是通过分泌一些因子促进血管生成和神经再生，但其机制尚未完全明确。本文的主要目的是探讨低氧预适应对老年人骨髓间充质干细胞体外培养作用的影响，为其用于缺血性脑卒中治疗临床研究提供依据。方法：采用全骨髓细胞贴壁法分离、培养50～70岁健康供者的骨髓间充质干细胞。倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化特征及增殖生长情况，取第3代细胞用于实验。用流式细胞仪检测人骨髓间充质干细胞表面标志物CD90、CD105、CD73和NBG。低氧环境构建为94%N2、1%O2、5%CO2的三气恒温细胞培养箱。用胰酶细胞消化液（0.25%Trypsin-EDTA)消化后的第3代细胞以1×106/ml的密度接种到培养瓶，置于94%N2、1%O2、5%CO2的三气恒温培养箱内培养48h，以常氧（21%O2）培养作为对照。用Western blot法检测细胞HIF-1α、VEGF、CXCR4、TLR4和NF-κB蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF浓度。细胞免疫组化法检测ki67表达阳性细胞率。结果：体外分离、培养的老年人骨髓间充质干细胞呈成纤维细胞样梭形外观，培养10～12天达80%融合，集落成旋涡状。细胞表面抗原高表达CD90、CD105和CD73，而NBG表达阴性。低氧预适应增强人骨髓间充质干细胞HIF-1α、VEGF、CXCR4、TLR4和NF-κB蛋白表达（P<0.05）。ELISA法检测结果显示，与对照组相比，低氧预适应组人骨髓间充质干细胞培养上清液中VEGF浓度增高（P<0.05）。低氧预适应组与对照组均能检测出ki67表达阳性细胞，阳性细胞数统计学无显著差异（P>0.05）。结论：低氧预适应可增强老年人骨髓间充质干细胞HIF-1α、VEGF、CXCR4、TLR4和NF-κB蛋白表达和分泌VEGF。提示低氧预适应可增强老年人自体骨髓间充质干细胞治疗脑缺血效果。