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多枝雾水葛Pouzolzia zeylanica (L.) Benn. Var. microphylla (Wedd.)W.T.Wang.（PZB）又名石珠，石珠仔。初始载于《生草药性备要》，其主要功效有解毒消肿，接骨，可用于痈肿，梅毒，肺结核。被民间广泛使用。前期对PZB药理作用的研究表明其对皮肤脓肿溃疡和炎症疼痛均具较好作用，并对其活性部位进行了初步筛选。化学成分研究表明该植物含有黄酮苷类、三萜类和木脂素类等，有必要进一步研究PZB抗炎镇痛有效部位和有效成分，探讨它们的抗炎作用机制。本文考察了PZB不同极性部位体内抗炎镇痛作用、体外抗炎活性和体外抗菌活性，并对抗炎机制进行了初步探讨；在化学成分研究基础上，对几个特征化合物进行了体外抗炎作用及机制研究；考察了PZB药效部位大孔吸附树脂纯化工艺。主要研究内容和结果如下：1.选用大孔吸附树脂将多枝雾水葛水总提物（AE）分为不同极性部位：水部位（WP）、30%乙醇部位（30%EP）、60%乙醇部位（60%EP）和85%乙醇部位（85%EP）。根据专利报道方法，得到总黄酮类物质。（1）比较各极性部位的抗炎镇痛作用，筛选有效部位。建立醋酸致小鼠扭体和二甲苯致小鼠耳肿胀模型，测定小鼠扭体次数和耳肿胀度。结果显示AE、WP和30%EP组小鼠扭体次数和小鼠耳肿胀度与空白对照组相比均有显著性差异，60%EP和85%EP对小鼠扭体和小鼠耳肿胀无明显抑制作用。说明AE、WP和30%EP均有抗炎镇痛作用，60%EP和85%EP无明显抗炎镇痛作用。（2）研究AE、WP、30%EP及总黄酮体外抗炎作用和机制。建立脂多糖（LPS）诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外炎症细胞模型，用Griess法测定细胞培养上清液中NO含量，用酶联免疫法（ELISA）检测TNF-α与PGE2含量。结果表明，80μg/mlAE组，40和80μg/ml WP组，30%EP各浓度组和总黄酮中、高浓度组均明显减少NO；AE高浓度组，30%EP各浓度组和10和20μg/ml总黄酮组均明显减少PGE2和TNF-α含量，WP各浓度组能减少PGE2含量，40和80μg/ml WP组能减少TNF-α含量。说明AE、WP、30%EP及总黄酮均具有一定抗炎作用,抑制巨噬细胞炎症因子的释放是其抗炎机制之一。推测黄酮类可能为该植物有效成分之一。（3）采用打孔法，通过测定抑菌圈的大小考察AE、WP、30%EP、60%EP和85%EP对金黄色葡萄球菌的抑制作用。结果显示，AE组抑菌圈为9mm，其他组均无明显抑菌圈。说明AE对金黄色葡萄球菌有一定抑制作用，其他部位均无明显抑菌作用。2.从课题组分离的化合物中选择部分代表性化合物，研究化合物的体外抗炎作用和机制：1（Pouzolignan D）、2（Pouzolignan C）、3（Pouzolignan E）、4（Pouzolignan F）、5（Pouzolignan G）、6（木栓酮）、7（牡荆苷）、8（槲皮素-3,7-O-2-α-L-吡喃鼠李糖苷）、9(槲皮素3-O-[α-L-鼠李糖(1→6)-β-D-葡萄糖]-7-O-α-L-鼠李糖苷)。化合物1-5为木脂素类，6为木栓烷类三萜，7-9为黄酮苷类。建立LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外炎症细胞模型，用Griess法测定细胞培养上清液中NO含量，用酶联免疫法（ELISA）检测TNF-α与PGE2含量；用实时定量RT-PCR法检测iNOS、COX-2和TNF-α mRNA表达量。结果表明，化合物1-7均抑制炎症细胞释放NO，化合物8和9无明显抑制作用；化合物1-3能减少PGE2和TNF-α的释放，化合物7高浓度组降低PGE2含量；化合物1对COX-2和TNF-α的mRNA表达均有抑制作用，化合物2中iNOS、COX-2和TNF-α的mRNA表达量均显著低于模型组，化合物3对iNOS的mRNA表达有明显抑制作用。说明，化合物1-7均有一定体外抗炎作用，化合物8和9无明显抗炎作用。化合物1通过抑制COX-2和TNF-α mRNA的表达抑制PGE2和TNF-α释放，且抑制NO释放而发挥抗炎作用；化合物2通过抑制iNOS、COX-2和TNF-αmRNA表达抑制NO、PGE2和TNF-α释放而发挥抗炎作用；化合物3通过抑制iNOS mRNA表达而抑制NO释放，且抑制PGE2和TNF-α释放而起到抗炎作用。化合物7通过抑制PGE2和NO释放起到抗炎作用。3.考察PZB药效部位大孔吸附树脂的纯化工艺。采用紫外分光光度法建立了总黄酮、总三萜及总酚酸含量测定方法，以这三种成分含量为指标，从9种不同极性树脂中筛选得到吸附与解吸附性能最佳树脂的树脂HP20，进一步考察不同条件对成分吸附和解吸附的影响。结果显示，上样pH为4和浓度为0.2g/ml的样品液3.3BV，上样后静置3h，用2BV蒸馏水洗后，用4BV60%乙醇作为洗脱剂，洗脱流速2.00ml/min，样品液中的总黄酮的吸附率和解吸率达到90%左右，总酚酸的吸附率和解吸率都在85%以上，总三萜的吸附率和解吸率比大孔树脂纯化前提升了一倍。为PZB药效部位的进一步开发奠定了基础。