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背景：糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症,肾小管间质炎症及纤维化与糖尿病肾功能恶化密切相关。肾小管上皮细胞转分化(TEMT)是糖尿病间质纤维化的关键环节之一。NLRP3及其参与组装的炎症复合体在糖尿病肾小管间质炎症及纤维化中起着重要作用,但其具体机制阐述尚不完全,NLRP3是否参与高糖诱导的TEMT过程尚未见报道。研究报道galectin-1可能与肾间质纤维化抑制有关,与NLRP3作用相反,两者之间是否存在相互调控目前亦未见报道。目的：①.观察不同浓度葡萄糖作用于人肾小管上皮细胞株(HK-2)不同时间后细胞内NLRP3、IL-18、α-SMA、E-cadherin及galectin-1的表达并初步探讨它们之间的关系；②.使用NLRP3siRNA抑制NLRP3在HK-2细胞中的基因表达,探讨NLRP3在高糖诱导TEMT中的作用及其表达与galectin-1的关系。方法：常规培养HK-2细胞。依据不同实验目的分为三大组,其中一组根据不同葡萄糖浓度(均作用48h)分为5个小组：正常对照组(5.6mM葡萄糖)、15mM高糖(HG)组、30mM HG组、45mM HG及高渗对照组(5.6mM葡萄糖+39.4mM甘露醇)组；另一组按30mMHG作用不同时间分为12h、24h、48h3个小组；最后一组分为正常对照组、30mM HG组、NLRP3siRNA转染+30mM HG组及无关siRNA转染+30mM HG组。光镜下观察细胞形态学改变,Real-time PCR及Western Blot等技术检测NLRP3、IL-18、α-SMA、E-cadherin及galectin-1在细胞内基因及蛋白水平的表达。结果：①.HG作用下,HK-2细胞形态由铺路石样向梭形改变,与高糖呈浓度依赖性,高渗对照组细胞形态与正常对照组相比无差别。②.HG作用下,HK-2细胞内NLRP3mRNA及蛋白的表达均上调,与高糖呈浓度及时间依赖性,其下游促炎症细胞因子IL-18蛋白表达也升高(*P<0.05、**P<0.01VS正常对照组)；与此同时,HK-2细胞内a-SMA mRNA及蛋白的表达上调,而E-cadherin mRNA及蛋白表达下调(*P<0.05、,**P<0.01VS正常对照组)；此外,HG作用下HK-2细胞内galectin-1蛋白的表达亦上调(*P<0.05、**P<0.01VS正常对照组),与高糖呈浓度及时间依赖性；高渗对照组以上各指标的表达与正常对照组相比无差别。③.30mM HG作用下HK-2细胞内NLRP3mRNA及蛋白表达上调,转染NLRP3siRNA后其表达被显著抑制,同时其下游促炎症细胞因子IL-18蛋白表达也被抑制(*P<0.05VS30mM HG组)；30mmMHG作用下HK-2细胞内α-SMA mRNA及蛋白表达上调,E-cadherin mRNA及蛋白表达下调,转染NLRP3siRNA抑制HK-2细胞内NLRP3表达后,a-SMA表达也被抑制,而E-cadherin表达上调(*P<0.05VS30mM HG组);30mM HG作用下HK-2细胞内galectin-1蛋白表达上调,而转染NLRP3siRNA后,其表达更强。(*P<0.05VS30mM HG组)；无关siRNA转染+HG组以上指标的表达与高糖组无差别(P>0.05)。结论：①.高糖作用下,肾小管上皮细胞内NLRP3表达上调,与高糖呈浓度及时间依赖性,其下游炎症细胞因子IL-18在高糖作用下表达亦增加,NLRP3及以其为核心组装的炎症复合体可能参与高糖诱导的TEMT过程；②.高糖作用下,肾小管上皮细胞内galectin-1表达亦上调,与高糖呈浓度及时间依赖性,转染NLRP3siRNA后细胞内galectin-1表达更强,提示高糖条件下NLRP3的表达可能部分负调控了galectin-1的表达。我们实验首次证明了NLRP3在高糖诱导TEMT中的作用以及NLRP3与galectin-1的关系,从而为糖尿病肾间质纤维化以NLRP3为治疗靶点提供了实验依据。