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目的: 1.建立新生大鼠NEC模型，探讨IRAK1/4抑制剂对NEC新生大鼠肠道的保护作用。 2.探讨IRAK1/4抑制剂对NEC新生大鼠肠组织TLRs信号通路的调控作用，从而阐明IRAK1/4抑制剂对NEC新生大鼠肠道保护作用的可能机制。 方法: 1.新生大鼠NEC模型的建立：将36只新生SD大鼠随机分为正常对照组、NEC模型组和 IRAK1/4抑制剂组，每组12只。正常对照组与母鼠同窝进行母乳喂养，NEC模型组及IRAK1/4抑制剂组出生后即脱离母鼠，在保育箱中进行配方乳人工喂养（q4h），并对新生鼠进行缺氧冷刺激（q12h），其中IRAK1/4抑制剂组新生鼠每天给予腹腔注射IRAK1/4抑制剂一次（剂量0.3μmol/kg），72h后对所有新生大鼠禁食12h。在造模过程中每天监测各组新生大鼠的体重，观察各组新生鼠的一般情况、活动度、有无腹胀、大便性状以及死亡等情况。 2.造模结束后颈椎脱臼处死各组新生大鼠，取出回盲部近端回肠组织，部分置于中性甲醛固定，并进行石蜡包埋、染色等处理制作病理切片，并进行病理学评分。剩余肠道组织标本使用ELISA法检测其IL-1β、IL-6及TNFα的含量；使用Western blotting法检测IRAK1、IRAK4、NF-κB的水平；以及使用荧光定量PCR检测各组肠道标准本中miRNA-146a的相对表达水平。 结果: 1.IRAK1/4抑制剂对NEC大鼠肠道组织的保护作用 1.1新生大鼠的一般状态：造模后NEC模型组新生大鼠逐渐出现排黄绿色粘液，部分严重者可见粘液血便；出现胃排空延迟，腹胀，进奶量减少；活动减少，反应差，嗜睡，抱团反应减弱甚至消失，且程度逐渐加重，皮下脂肪逐渐变薄。IRAK1/4抑制剂组新生大鼠开始造模后，也逐渐出现腹胀、腹泻，解黄绿色粘液便，出现时间更晚，程度较NEC模型组轻，也表现出活动减少，反应迟钝，皮下脂肪变薄。正常对照组的新生大鼠活力正常，无腹胀腹泻，反应良好。 1.2体重增长情况：正常对照组新生大鼠体重增长趋势明显，平均增长（3.09±0.38）g；NEC模型组与IRAK1/4抑制剂组大鼠体重无明显增长，且有下降趋势，其中 NEC模型组体重增长(-0.43±0.15)g，抑制剂组体重增长(-0.40±0.11)g。IRAK1/4抑制剂组体重下降程度较NEC模型组稍轻，差异无统计学意义（P=0.956）；抑制剂组体重增加明显低于正常对照组，差异有统计学意义（P=0.00）；NEC模型组体重增加亦明显低于正常对照组，差异有统计学意义（P=0.00）。 1.3病理评分：正常对照组、NEC模型组、IRAK1/4抑制剂组病理评分分别为（0.33±0.49）、（3.08±0.99）、（1.75±0.96），NEC模型组 a、IRAK1/4抑制剂组 b分别与正常对照组 c比较，差异均有统计学意义（Hac=2，Pac=0.00；Hbc=12， Pbc=0.00），抑制剂组与 NEC模型组比较差异有统计学意义（H=25.5,P=0.006）。 2. IRAK1/4抑制剂对新生大鼠肠道粘膜TLRs信号通路的调控 2.1各组肠组织中 IL-1β、IL-6和 TNF-α水平：正常对照组分别为：128.76±27.25，0.41±0.10，6.93±1.79；NEC模型组分别为：410.99±44.16，1.79±0.18，44.39±6.00；IRAK1/4抑制剂组分别为：256.23±41.29，1.05±0.19，21.45±6.36。NEC模型组肠组织标本中 IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别与正常对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.01）； IRAK1/4抑制剂组肠组织标本 IL-1β、IL-6和 TNF-α水平分别与正常对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.01）；将IRAK1/4抑制剂组IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别与 NEC模型组进行比较，差异均有统计学意义（P<0.01）。 2.2各组肠组织中 IRAK1、IRAK4和 NF-κB水平：正常对照组分别为：0.254±0.026，0.131±0.159，0.119±0.27；NEC模型组分别为：0.591±0.17，0.364±0.037，0.353±0.035；IRAK1/4抑制剂组分别为：0.541±0.184，0.333±0.295，0.236±0.16。NEC模型组及IRAK1/4抑制剂组IRAK1蛋白水平均高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05）,IRAK1/4抑制剂组IRAK1与NEC模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）； NEC模型组及抑制剂组IRAK4蛋白水平均高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.01）,IRAK1/4抑制剂组 IRAK4蛋白水平与NEC模型组相比，差异无统计学意义（P>0.05）； NEC模型组及IRAK1/4抑制剂组 NF-κB水平均高于正常组，差异有统计学意义（P<0.01）,IRAK1/4抑制剂组NF-κB水平低于NEC模型组，差异有统计学意义（P<0.01）。 2.3各组肠组织中miRNA-146a水平：正常对照组：NEC模型组和IRAK1/4抑制剂组肠组织miRNA-146a水平分别为1.82±0.76，4.50±2.87和5.51±3.83。NEC模型组 miRNA-146a水平高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05）,IRAK1/4抑制剂组高于正常组，差异有统计学意义（P<0.01），IRAK1/4抑制剂组与NEC模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论: 1. IRAK1/4抑制剂对坏死性小肠结肠炎新生大鼠的肠道具有保护作用，能够减轻肠道的损伤的严重程度,降低NEC的发病率。 2.TLRs信号通路参与了坏死性小肠结肠炎新生大鼠肠道损伤的形成， IRAK1/4抑制剂可以通过抑制TLRs信号通路，从而抑制NEC模型的炎症反应，减少促炎细胞因子的释放，减轻对肠道组织的损伤。