龙脑樟组织培养再生体系研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:tim826
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樟树(Cirmamonun Camphora(L) presl)中含有的龙脑,具有重要的药用价值,被认为是我国冰片生产的最佳原料。龙脑樟有植物黄金的美誉,既是高级香料,又是名贵稀有药材,同时也是化工原料。本试验以优良龙脑樟扦插苗为基本研究材料,通过无性系繁殖获得植株,在组织培养过程中,开展了对龙脑樟不同外植体灭菌方式、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗和移栽等多个试验,建立龙脑樟无性繁殖体系。为龙脑樟工厂化育苗奠定基础。本试验的研究结果如下:1.龙脑樟无菌体系的建立。顶芽茎段使用:75%乙醇8s+0.1%HgCl2 8min+2滴吐温效果最好;茎段中部使用:75%乙醇10s+0.1%HgCl2 10min+2滴吐温效果最好;茎段基部:75%乙醇20s+0.1%HgCl2 15min+2滴吐温效果最好,可使外植体污染率降到最低,成活率最高。2.龙脑樟愈伤组织诱导。试验结果表明,外植体诱导愈伤组织难易排序:茎段>叶柄>嫩叶,选择茎段为愈伤组织外植体。愈伤组织诱导率最高的培养基配方为:MS+2,4-D3.0 mg/L+NAA0.4 mg/L+IBA0.4 mg/L;通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟愈伤组织诱导影响作用的顺序为:2,4-D>IBA>NAA,2,4-D对龙脑樟愈伤组织诱导影响最大。3.龙脑樟不定芽诱导。试验结果表明,顶芽茎段的萌芽率明显高于带腋芽茎段。龙脑樟不定芽芽诱导培养基配方为:MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20h/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为:6-BA>NAA>蔗糖,6-BA各种浓度对不定芽诱导影响显著。4.抑制褐化。试验通过三种方式抑制褐化,试验结果表明,通过使用AC对外植体褐化抑制效果最佳,AC浓度在1.0g/L时抑制龙脑樟外植体褐化能力最强。5.龙脑樟愈伤组织诱导不定芽。愈伤组织继代增殖系数最高的培养基配方为:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.6mg/L+蔗糖20g/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为:6-BA>NAA>蔗糖。6.龙脑樟继代增殖培养。极差分析中的R值得出,各因素对不定芽增殖培养影响作用的顺序为:6-BA>NAA>IBA。不定芽增殖系数最高的培养基配方为:MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.25mg/L。7.继代次数对龙脑樟苗继代的影响。进行多次继代培养试验,研究多次继代对龙脑樟增殖系数的影响。随着继代次数增加,龙脑樟继代增殖系数先升后降。第二次继代平均增殖系数最大。8.龙脑樟的生根培养。龙脑樟组培苗生根最适宜培养基配方为:1/2MS+IBA0.5 mg/L+IAA1.0 mg/L+AC0.2g/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为:6-BA>NAA>IBA。9.龙脑樟组培苗的移栽和炼苗。不同基质对龙脑樟组培苗移栽试验中,泥炭土:木屑=1:1的成活率明显高于其他基质。
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