五加皮系五加科植物细柱五力Acanthopanax gracilistylus W.W. Smith的干燥根皮,为常用中药。在临床应用中,由于别名,药用部位,成品性状,作用功效相似,与香加皮混用严重。香加皮与五加皮虽同为祛风湿药,但来源、功效、应用、药理作用不尽相同。香加皮中含有杠柳毒苷,它有剧烈的强心作用但同时又为毒性成分,误用或过剂量服用甚至会导致死亡。另一方面,对五加皮化学成分报道甚少,药效物质基础也尚未阐明。2010版《中国药典》一部五加皮项下仅规定了性状、显微鉴别、水分、总灰分等检查项;没有TLC鉴别、浸出物、含量测定等项目规定。鉴于如此混乱的临床药用情况,本课题对五加皮及其饮片进行质量标准研究。首先从细柱五加的根皮寻找可用于区别香加皮及其它混淆品种的特征成分,确定了三个成分作为鉴别以及含量测定的对照品。通过柱色谱,半制备色谱,重结晶分离得到三个化合物,均为二萜为类成分,通过红外光谱,紫外光谱,质谱,核磁共振氢谱,碳谱,旋光,单晶X-衍射鉴定了结构,分别为ent-kaur-16-en-19-oic acid(异贝壳杉烯酸(WJP-1)),ent-16pH,17-isovalerate-kauran-19-oic acid(WJP-2)和ent-16βH,17-methyl butanoate-kauran-19-oic acid(WJP-3),其中WJP-2,WJP-3为同分异构体。WJP-2,WJP-3均为首次从五加皮中分离得到。文献报导此类化合物有多种活性,这三个化合物在五加皮中含量很高,有可能为五加皮的主要活性成分。本课题进行细胞毒活性实验,结果表明均有中等强度的细胞毒活性,从而佐证了文献的报道。因此,无论从特征性,活性,以及含量方面,这三个化合物均符合对照品的要求,能真实客观的评价五加皮的真伪与品质。以WJP-1,WJP-2,WJP-3和对照药材首次建立TLC鉴别方法,以石油醚：丙酮：异丙醇：甲酸=12：2：0.5：0.1为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点清晰检视。结果发现,25批五加皮样品有11批与五加皮对照药材以及对照品在相应的位置,显相同颜色的斑点,香加皮对照药材及伪品未见对照斑点,表明方法专属性较强。但由于受对照品制备难易程度的影响,建议使用对照品WJP-1和对照药材为对照标准,建立TLC鉴别方法。首次建立了HPLC测定分别五加皮WJP-1,WJP-2,WJP-3含量的方法。用环己烷提取供试品溶液,以蒸发光散射检测器检测。WJP-1的含量测定的色谱条件为：色谱柱Phenomenex C182.6μm(100×4.6mm);流动相：乙腈：水(50.2：49.8)；柱温：20℃。测定11批五加皮中WJP-1的含量,并计算干燥品含量。实验结果显示,WJP-1在2.006gg-40.12μg质量范围内进样质量对数与峰面积对数呈良好的线性关系(R2=0.9998),平均加样回收率为101.21%,RSD值为1.46%(n=6)。WJP-2.WJP-3含量测定的方法为,色谱柱AgeIa promosil C185μm(250×4.6mm)；0-20min乙腈：水=77：23；20-60min乙腈：水=77：23→乙腈：水=70：30,柱温30℃。实验结果显示,WJP-2在1.1541μg～11.541μg质量范围内进样质量对数与峰面积对数呈良好的线性关系,lgA=1.4848lgx+2.0491(R2=0.9999),平均加样回收率为99.11%,RSD值为2.76%。WJP-3在2.076μg-20.76μg质量范围内进样质量对数与峰面积对数呈良好的线性关系,lgA=1.46011gx+2.0613(R2=0.9999)平均加样回收率为98.78%,RSD值为1.75%。11批五加皮中以干燥品计,WJP-1含量为0.7008%～2.1662%,WJP-2含量为0.1634%～0.3388%,WJP-3含量为0.1644%～0.5108%。由于受分析方法适用性影响,建议以WJP-1为质量控制指标,以干燥品计算,WJP-1含量不得少于0.9%。依据《中国药典》2010版相关要求测定了11批五加皮水分,总灰分,酸不溶性灰分,醇溶性浸出物含量。并规定了相关的限度分别为水分不得超过12%,总灰分不得超过11.5%,酸不溶性灰分不得超过3.5%,浸出物不得少于10.5%。《中国药典》2010版五加皮饮片项下仅有其炮制方法,未对其质量标准做何规定。五加皮所建立的TLC鉴别和含量测定方法同样适用于五加皮饮片真伪鉴定及品质评价。五加皮饮片中WJP-1含量,以干燥品计含量为0.6005%～-1.6263%,建议以干燥品计算,WJP-1含量不得少于1.00%。饮片水分不得超过11%,总灰分不得超过11.5%,酸不溶性灰分不得超过3.5%,浸出物不得低于10.5%。