1,3-丙二醇高产菌株的诱变选育及其发酵条件优化

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hunan341
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文从已有的三株菌中筛选出一株能生产1,3-丙二醇且性能良好的菌株—克雷伯氏肺炎杆菌As1.1736作为出发菌株,并对其种子培养条件进行优化。为了进一步获得1,3-丙二醇的高产突变株,以克氏肺炎杆菌As1.1736为出发菌株进行诱变处理,并对发酵培养条件进行初步优化。 甘油由克氏肺炎杆菌转化生成1,3-丙二醇的研究是在厌氧条件下进行的,采用空气置换和降低氧化还原电位相结合的方法制备预还原培养基。取对数期单细胞菌悬液适量,在紫外线最适照射剂量下诱变筛选高产突变株;再经DES溶液诱变筛选出高产突变株,然后将经DES诱变得到的高产菌株在两次浓缩的基础上进行UV+LiCl复合诱变,经过建立在影印技术上的初筛和复筛后采用高效液相色谱法测1,3-丙二醇的产量以确定高产突变株;分别对温度、pH等培养条件和碳源、氮源、酵母膏、金属离子等组分进行单因素实验,确定甘油转化生成1,3-丙二醇的主要影响因素,然后通过正交实验进行培养条件优化。 实验研究结果表明:克氏肺炎杆菌是兼性厌氧菌,以克氏肺炎杆菌为出发菌株,经过紫外线诱变、硫酸二乙酯(DES)诱变及紫外线(UV)和氯化锂(LiCl)复合诱变得到突变株K.pneu4046,其1,3-丙二醇产量由出发菌株的4.7g/L提高到16.1g/L,提高了3.43倍;高浓度甘油对K.pneu4046的生长具有较大的抑制作用,当甘油浓度为9%时抑制作用十分明显;酵母膏是1,3-丙二醇发酵所必需的营养组分,添加适量的酵母膏将有利于1,3-丙二醇的产生;通过对菌株K.pneu4046培养条件的优化,确定最适发酵培养基(L-1)是:甘油60g,K2HPO41.3g,KH2PO40.5g,CaCl20.1g,MgSO4·7H2O0.2g,NH4Cl2.0g,Fe液1mL,酵母膏2.0g,微量元素液1mL。在该优化条件下K.pneu4046突变株的1,3-丙二醇产量为21.3g/L;通过正交实验可知温度、pH和接种量对发酵有着重要的影响,当温度为37℃、接种量为5%、pH为7.0时有利于甘油向1,3-丙二醇的转化;在最适发酵培养基和最适发酵条件下,1,3-丙二醇最高产量可达24.38g/L。
其他文献
近年来,以防爆柴油机为牵引力的井下无轨运输逐渐成为主流,但是对柴油机进排气系统进行防爆改造,将导致其不能同时兼顾动力性和排放特性,尤其微粒排放大大增加,这势必威胁到
瓦斯是煤矿开采过程中的伴生气体,主要的可燃成分是甲烷,空气中瓦斯的爆炸极限是5%~15%。煤矿安全规程规定:瓦斯的利用浓度必须高于30%,而低于30%的低浓度瓦斯气体只能排放到
本文通过对荣华二采区10
期刊
糖酯是一类用可再生资源合成的、无毒、易生物降解的非离子型表面活性剂,目前已经广泛应用于食品、医药和化妆品等行业,并且可以通过调控脂肪酸和糖的种类以及酰化的程度来合成
随着我国经济高速发展,人民消费水平日益提高,越来越多的消费者对家居生活有了更高的要求,涂料市场环保涂料的需求也日益增加。2015年,作为涂料经销商该从哪些方面入手,抓住
质子交换膜(PEM)是质子交换膜燃料电池(PEMFCs)的关键部件,其可靠性对燃料电池寿命有着至关重要的影响,研究其力学性能具有重要意义。本文利用动态力学分析仪(DMA-Q800)对PEM的基本力学性能进行了测试,考察了Nafion?-212在工作温度(85℃)下,受到循环应力作用时,其棘轮应变和棘轮应变率的变化情况,得出平均应力,应力幅,应变率等因素对材料棘轮应变的影响;还研究了其在高温(70℃
植物甾醇酯可以降低人体血液胆固醇的水平,已经作为功能性成分应用到食品生产中。本文以植物甾醇中存在最广泛的β-谷甾醇为原料,合成共轭亚油酸β-谷甾醇酯(CLS)并研究了其功
本课题筛选出高产红曲红色素的菌株。通过单因素试验研究不同培养条件对固态培养红曲霉产红色素色价的影响,并通过正交试验进一步优化了红曲霉产红色素的固态培养条件。通过单
纳米流体作为一种强化换热工质具有独特的传热特性,可显著提高基流体的导热系数,增强热交换系统的传热性能。一部分学者在研究纳米流体的传热性能时,得出了很多出乎意料的结
本论文对陈皮提取物的抗氧化活性进行了系统全面的研究。 实验研究了通过最佳提取工艺条件制备的陈皮提取物中总黄酮地含量,达24.43﹪,并通过HPLC分析测定了陈皮提取物中的一