干扰素(Interferon, IFN)是一类具有广谱抗病毒、抗肿瘤和增强免疫功能的细胞因子,可作为免疫佐剂以提高疫苗的保护效力。一般情况下,天然干扰素难以直接提取纯化和大量制备。猪病毒性疾病在养猪业生产中的危害较大,是影响养猪业健康发展最重要的一类疾病。因此,猪干扰素基因工程制品的研制与开发具有广阔的应用前景。本研究利用RT-PCR技术克隆了猪干扰素-α基因(PoIFN-α)和猪干扰素-γ基因(PoIFN-β),并人工合成了PoIFN-β基因。并以我国自行选育的一株新城疫病毒rLaSota弱毒疫苗株为载体,分别将猪干扰素-α基因(PoIFN-α)、猪干扰素-β基因(PoIFN-β)和猪干扰素-γ基因(PoIFN-γ)插入NDV LaSota疫苗株基因组P和M基因之间,构建了表达PoIFN-α、PoIFN-β和PoIFN-γ成熟蛋白的重组NDV全基因组cDNA克隆,通过反向遗传操作分别拯救出稳定表达猪干扰素-α、猪干扰素-β和猪干扰素-γ的重组NDV,rLaSota-PoIFN-α、rLaSota-PoIFN-β和rLaSota-PoIFN-γ;通过RT-PCR检测,扩展到目的片段;通过免疫荧光检测,观察到被感染的BHK-21细胞膜上有强的荧光信号;通过western-blot分析,检测到特异反应条带;在BHK-21细胞系中检测重组病毒抗病毒生物学活性,结果表明重组病毒表达的猪干扰素均可以不同程度地抑制VSV-GFP在BHK-21细胞系中的增殖并具有较高的抗病毒活性。干扰素的抗病毒作用与干扰素的浓度呈正相关性。