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乙型脑炎(Janpanese encephalitis,JE)又称流行性乙型脑炎(简称乙脑),是由黄病毒科黄病毒属的乙型脑炎病毒(Janpanese encephalitis virus,JEV)引起的一种严重危害人畜健康的中枢神经系统疾病。目前没有治疗乙脑的有效药物,接种乙脑疫苗是控制乙脑的重要措施。国际上广泛使用的乙脑疫苗主要是灭活苗,我国使用的主要是SA14-14-2株原代地鼠肾细胞减毒活疫苗。以上两种疫苗都存在一些缺点,诸如过敏反应,造价昂贵等等,因此研究一种经济、有效、安全性好的疫苗越来越必要。E蛋白是乙脑病毒的囊膜蛋白,已经证明E蛋白是与细胞膜受体相结合而与细胞膜融合使病毒进入细胞的主要蛋白,与病毒的吸附、侵入、致病性、组织嗜性、血凝反应、血清特异性和诱导宿主的免疫应答等紧密相关。本研究将乙型脑炎病毒E蛋白表面展示在杆状病毒囊膜上,形成重组杆状病毒,并对其免疫原性进行研究,得到如下结果:1表达乙型脑炎病毒E蛋白的重组杆状病毒的构建合成特异性引物P1、P2,PCR扩增得到E基因,将其插入经Xba I、EcoR I双酶切的pBacSC转移载体中,构建重组转移质粒pBacSC-E;重组质粒转化DH10BAC大肠杆菌,通过抗性及蓝白斑筛选,得到重组穿梭载体BacSC-E;采用脂质体介导法转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒;通过Western Blot分析、激光共聚焦显微镜分析及免疫电子显微镜分析,证明E蛋白在昆虫细胞膜及重组杆状病毒囊膜上得到表达。2重组杆状病毒免疫原性研究将重组杆状病毒免疫Balb/C小鼠,以注射乙型脑炎减毒活疫苗的小鼠作为阳性对照组,以注射PBS的小鼠作为阴性对照组,第4组注射未重组杆状病毒。ELISA方法检测免疫鼠血清抗体效价为1:5000,阳性对照鼠血清抗体效价达到1:4000。抗体中和试验结果表明免疫组鼠血清的中和活性达到1:32,阳性对照组的中和效价为1:16。淋巴细胞增殖试验中测得免疫组淋巴细胞分裂指数SI达到5.20,而疫苗组仅为2.13。以上数据证明重组杆状病毒具有较好的免疫原性,有望成为一种新型的乙脑疫苗。