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目的构建并鉴定胎盘特异性高表达CD81转基因小鼠,并进一步评价该模型鼠的子痫前期(preeclampsia,PE)相关表型及分子病理改变,体内研究胎盘特异性表达CD81导致PE发病的机制。方法构建pGL3-syncytin1 promoter-CD81重组质粒,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测该质粒在滋养细胞株(HTR8/SVneo细胞、BeWo细胞)及非滋养细胞株(IshiKawa细胞、COS7细胞、HUVEC细胞、HGC-27细胞)中的转录激活情况。随后通过显微注射法将上述质粒整合至小鼠基因组,构建syncytin1 promoter-CD81转基因首建鼠。将首建鼠与C57BL/6野生型小鼠杂交,利用PCR鉴定阳性子代鼠,确定转入基因遗传稳定性及纯化转基因鼠遗传背景。同时通过qRT-PCR、蛋白质印记(Westernblot)、免疫组织化学染色技术检测转基因鼠胎盘及其他器官中CD81表达水平。最后,将所构转基因雌雄鼠分别与C57BL/6野生型小鼠交配,使用尾套法检测孕鼠血压、统计胎仔数量及重量、HE染色分析肾脏病理改变、HE及免疫组织化学染色分析胎盘病理及分子改变等。结果 pGL3-syncytin1 promoter-CD81 重组质粒在 HTR8/SVneo 细胞及 BeWo 细胞中转录激活,CD81表达分别升高10.86±0.40倍(P=0.0001)和21.83±7.64倍(P=0.0344)。在IshiKawa细胞、COS7细胞、HUVEC细胞中CD81表达未见明显升高。但是在HGC-27细胞中,CD81转录升高9.10±0.63倍(P<0.0001)。Syncytin1 promoter-CD81转基因首建鼠基因组CD81阳性表达,其子代鼠DNA CD81阳性率约44.2%。在转录水平上,子代阳性鼠胎盘CD81 mRNA较野生型鼠明显升高,其中父源性转基因鼠升高16.23±3.793倍(P=0.0011),母源性转基因鼠升高3.61±0.3364倍(P<0.0001),而心脏、肝脏、脾脏、肺脏、动脉、肌肉等器官未见升高。在蛋白水平上,父源性及母源性转基因鼠胎盘中CD81蛋白含量增高。胎盘免疫组化染色可见转基因阳性鼠胎盘迷路层CD81分布增加。父源性及母源性转基因组孕鼠血压自G9天开始出现升高趋势,后逐渐升高,并保持高水平至G17处死。同时可见孕鼠肾脏肾小球肿胀,胎仔体重减轻趋势(对照组0.812±0.010g,父源性转基因组0.766±0.016g,P<0.05,母源性转基因组0.799±0.012g,P>0.05)。胎盘螺旋动脉染色显示CD81转基因组小鼠胎盘系膜三角区存在CK-7染色阴性而α-SMA染色阳性,与对照组表现相反。结论pGL3-syncytin1 promoter-CD81重组质粒可实现滋养细胞特异性转录激活,以此构建的syncytin1 promoter-CD81转基因鼠可稳定遗传,并且实现胎盘特异性高表达CD81。无论父源性或母源性CD81胎盘高表达均可导致孕鼠出现高血压、肾脏损伤、胎儿生长受限等PE症状,其发生与胎盘CD81高表达影响螺旋动脉重塑有关。