猪肉是全世界最受欢迎的肉类,脂肪含量是猪肉产量和瘦肉率的决定因素之一。在遗传育种角度,减少背膘厚度,提高瘦肉率,也已成为各大猪场遗传育种的关键目标,而背膘厚与瘦肉率的重要参数之一即是皮下脂肪含量。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一类广泛存在于生物体内的不编码任何蛋白质的RNA,其大多不保守,但其中有一类在各物种进化过程中序列保持完全相同,被称为超保守lncRNA。目前研究表明,其功能和普通lncRNA基本一致,可对各项生命活动进行调节,例如细胞增殖、分化、自噬、凋亡与迁移等。至于其在脂肪发育过程中的作用,现阶段的相关研究较少。本研究通过ob/ob、WT小鼠皮下脂肪差异表达lncRNAs与UCbase数据库比对,筛选出一个在两种鼠中表达差异极显著的lnc uc428;通过生物信息学验证其位置、保守性和编码能力,通过半定量PCR及FISH技术检测其在猪和小鼠体内的存在及核质定位;通过过表达载体转染以及腺相关病毒注射技术,以实现在猪皮下前体脂肪细胞内和小鼠活体上过表达lnc uc428;通过转染si RNA,以达到在细胞水平上抑制lnc uc428表达的目的;利用流式细胞术、CCK8和Ed U染色检测对猪脂肪细胞增殖的影响;结合BODIPY、Adipo Red及油红O染色研究对脂肪细胞分化的作用,同时利用Real-Time q PCR和WB对增殖和分化相应的基因进行了检测,并结合双荧光素酶报告载体技术对相应的机制进行了探索。获得的主要研究结果如下:1.Lnc uc428在猪和小鼠中超保守;在猪皮下脂肪细胞增殖过程中,表达趋势先减后增,在增殖后期其表达量最高。分化过程中,表达量先增加后减少,在分化中期其表达量最高;lnc uc428在大白猪各组织中均有一定的表达量,在皮下脂肪组织中有较高表达;lnc uc428在大白猪皮下脂肪细胞核质中均存在,主要定位于细胞质中。2.过表达lnc uc428,减少活细胞和处于DNA复制期的细胞数目,下调促增殖标志基因Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E的表达,上调增殖抑制因子P21的表达,减缓猪前体脂肪细胞的增殖;抑制猪皮下前体脂肪细胞的分化,减少细胞内脂滴,并且降低成脂相关基因及蛋白的水平,促进脂解关键基因和蛋白的表达。3.干扰Lnc uc428,促增殖相关基因和蛋白的表达上调,促进猪皮下前体脂肪细胞增殖;细胞内脂滴增多,成脂相关基因及蛋白的水平上升,脂解相关基因和蛋白的表达降低,促进猪皮下前体脂肪细胞的分化。4.过表达lnc uc428,与Maf K基因竞争性吸附mi R-503,导致Wnt10b表达升高,进而引起Wnt/β-catenin信号通路相的表达上调,促进猪皮下前体脂肪细胞的分化。5.腹腔注射腺相关病毒过表达lnc uc428,促进了小鼠脂肪组织的脂质沉积。综上所述,lnc uc428抑制猪皮下前体脂肪细胞的增殖,促进猪皮下前体脂肪细胞的分化,这与其分子海绵mi R-503有关;Lnc uc428的小鼠异位过表达,促进肝脏和脂肪组织的脂质沉积。本研究从lncRNA的保守性出发,对猪和小鼠脂肪沉积的机制进行了探索,为猪的遗传改良提供了新的思路。